白芨加甲基叔丁醚灌注溶解膽固醇結(jié)石的實驗研究.pdf

1、目的：用手術(shù)置入人膽固醇結(jié)石的方法，建立白兔膽囊結(jié)石的動物模型，觀察白芨漿能否對甲基叔丁醚灌注溶石時動物的膽囊損傷保護作用以及觀察肝腎功能的變化，初步探究其作用機制。 方法：大白兔24只，簡單隨機法分為4組[空白對照組(生理鹽水組)，對照組(甲基叔丁醚組)，實驗組一(甲基叔丁醚加白芨高劑量組)，實驗組二(甲基叔丁醚加白芨低劑量組)]，每組6只。耳沿靜脈注射3％戊巴比妥鈉麻醉(1mg/kg)后固定于固定器上。手術(shù)游離氣管并進行氣管

2、插管防止其窒息死亡。開腹暴露膽囊，用小剪刀在膽囊頸剪一小口，待膽汁排凈后往膽囊里置入一顆稱好重量的膽結(jié)石。經(jīng)膽囊頸切口插入氣囊導(dǎo)管，縫合開口。同樣在膽囊底開一小口，置入導(dǎo)管后縫合。往導(dǎo)管注入生理鹽水確認縫合處無滲漏后，經(jīng)膽囊底導(dǎo)管注入生理鹽水2ml沖洗膽囊三遍。然后對照組往膽囊內(nèi)注入生理鹽水(2ml)，每隔30min一次，持續(xù)10h；甲基叔丁醚組往膽囊內(nèi)注入甲基叔丁醚(2ml)，每隔30分鐘灌注一次，持續(xù)10h；實驗組生理鹽水沖洗膽囊后

3、往膽囊注入白芨膠(其中高劑量組1g/20ml，低劑量組1g/40ml)，(2ml)，每隔30分鐘灌注一次，3h后，生理鹽水沖洗膽囊內(nèi)白芨膠后往膽囊內(nèi)注入甲基叔丁醚(2ml)每隔30分鐘灌注一次，持續(xù)10h；上述動物在往膽囊注入生理鹽水或藥物后用動脈夾夾緊進出導(dǎo)管管口，以使得膽囊保持充盈狀態(tài)。每隔30分鐘觀察動物的呼吸、心跳。實驗結(jié)束后，處死動物剪開膽囊，觀察結(jié)石溶解情況，計算溶石率。生理鹽水沖洗干凈膽囊后，觀察膽囊壁損傷情況，并將膽囊用

4、10％甲醛溶液保存，光鏡下觀察膽囊壁的損傷。上述動物于實驗前后分別頸動脈取血，分離血清測量血糖、尿酸含量、尿素氮、血肌酐含量、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性、γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶活性、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性以及AST/ALT值。光鏡觀察膽囊以及膽囊附近肝組織損傷情況。 結(jié)果：甲基叔丁醚組、白芨高劑量加甲基叔丁醚組、白芨低劑量加甲基叔丁醚組溶石率明顯高于生理鹽水組(P<0.01)。甲基叔丁醚組、白芨高劑量加甲基叔丁醚組、白芨低劑量加甲基叔丁

5、醚組溶石率兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)：各溶石給藥組兔子實驗后血尿素氮、血肌酐含量、尿酸含量略有升高但與生理鹽水對照組相比沒有顯著差異(P>0.05)；各給藥組實驗后兔子血天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶(GGT)活性均有所升高，但與生理鹽水組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。甲基叔丁醚組兔子實驗后血丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性與生理鹽水組相比有顯著升高(P<0.01)，白芨高劑量加甲基叔丁醚組與甲基

6、叔丁醚組相比ALT活性明顯降低(P<0.05)，白芨低劑量加甲基叔丁醚組實驗后兔血ALT活性有所上升，其升高程度與甲基叔丁醚組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。各組給藥組兔子血AST/ALT值均比實驗前有所下降，但與生理鹽水組相比下降無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。光鏡下觀察，生理鹽水組膽囊粘膜完整，無損傷(見圖8)。甲基叔丁醚組動物膽囊粘膜較多脫落、可見大量的炎癥細胞浸潤(見圖9、圖10)。白芨高劑量加甲基叔丁醚組個別膽囊僅見極少量