昆蟲病原線蟲共生菌YL001發(fā)酵液中抑菌活性物質(zhì)初步研究.pdf

1、農(nóng)藥在防治各種有害生物，提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量，改善農(nóng)作物品質(zhì)，發(fā)揮了巨大的作用，但化學(xué)農(nóng)藥長期的不合理使用給人類的生存環(huán)境也帶來了種種弊端，如：環(huán)境污染，殘留毒性、抗藥性問題等；隨著可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略的實(shí)施及社會要求的提高，與環(huán)境兼容性好、安全低毒、經(jīng)濟(jì)高效的微生物農(nóng)藥的研究和開發(fā)日益受到人們的重視，昆蟲病原線蟲共生菌以其獨(dú)特的優(yōu)勢成為微生物農(nóng)藥研究的熱點(diǎn)。本研究旨在通過活性追蹤從YL001菌發(fā)酵液分離得到有抑菌活性的化合物。 通過研究昆

2、蟲病原線蟲共生菌YL001菌株發(fā)酵代謝產(chǎn)物對20種植物病原真菌和6種細(xì)菌的抑菌活性，活性結(jié)果初步表明番茄灰霉病菌和臘狀芽孢桿菌對發(fā)酵液表現(xiàn)較高的敏感性；可以作為活性追蹤用菌種。而且組織法測定結(jié)果表明發(fā)酵液對番茄灰霉病具有較好保護(hù)和治療效果。采用管碟法初步研究了YL001發(fā)酵液活性的穩(wěn)定性，結(jié)果表明發(fā)酵液活性對溫度有較強(qiáng)穩(wěn)定性，當(dāng)溫度高于80℃時，活性明顯降低；發(fā)酵液在堿性條件下活性比較穩(wěn)定，在酸性條件下抗菌活性明顯降低；并測定了發(fā)酵液在

3、室內(nèi)25℃，RH=10％，避光通風(fēng)條件下120d內(nèi)活性的變化，結(jié)果表明發(fā)酵液保存到30d后活性開始明顯下降。 本研究對發(fā)酵液中蛋白和多糖類物質(zhì)進(jìn)行了分離和活性測定，結(jié)果表明發(fā)酵液的活性不是蛋白和多糖類物質(zhì)產(chǎn)生的，大分子物質(zhì)可能不是發(fā)酵液中活性成分；對發(fā)酵液中的小分子抗生素采用乙酸乙酯、氯仿、正定醇這3種不同極性的溶劑對發(fā)酵液進(jìn)行萃取并測定了各種溶劑萃取粗提物的抑菌活性，結(jié)果表明氯仿和正定醇可以有效的提取發(fā)酵液中活性成分；綜合考慮

4、，氯仿比較適合作為發(fā)酵液的萃取溶劑；以具有不同吸附性能的hp20、sp700、D101大孔樹脂為材料對發(fā)酵液進(jìn)行提取并對提取物進(jìn)行活性測定；以活性為指標(biāo)并綜合各方面因素，D101樹脂為最佳吸附樹脂，這些工作為進(jìn)一步分離純化活性化合物奠定了基礎(chǔ)。 通過對D101大孔吸附樹脂粗提物的活性追蹤，分離得到了A、B兩種化合物，并進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定和活性測定，初步確定其中一個為壞二肽類化合物，暫命名為：2，3-二甲基-β-氨基丁酸-甘氨酸環(huán)二肽