ERAP1、ANTXR2、IL1R2、IL23R、JAK2和STAT3多態(tài)性與強(qiáng)直性脊柱炎的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是一種致殘率很高的常見病，全球范圍內(nèi)的發(fā)生率為0.1％-0.9％，我國(guó)的發(fā)生率約為0.3％。AS的易感性極大程度上決定于遺傳因素，遺傳度超過90％。最為人們熟知的與AS易感性關(guān)聯(lián)的基因是主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）中的人類白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-B27，95％

2、的AS患者HLA.B27陽性。然而，HLA-B27陽性的普通人群中只有1％-5％發(fā)病，且HLA-B27對(duì)于AS遺傳易感性的貢獻(xiàn)僅占總體遺傳傾向的16％-40％，而雙胞胎和AS家系研究的數(shù)據(jù)表明非MHC基因的作用占了60-70％；AS的同胞危險(xiǎn)比率（λs）大約為82，其中λHLA值僅為5-6，而λ非MHC卻在14左右。這表明非MHC基因?qū)τ贏S的易感性具有十分重要的作用。近期，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨基肽酶（endoplasmic reticulum a

3、minopeptidase，ERAP）-1、炭疽毒素受體（anthrax toxin receptor，ANTXR）-2、白細(xì)胞介素1-2型受體（interleukinl type 2 receptor，IL1R2）和IL23受體（IL23R）基因單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）被發(fā)現(xiàn)與高加索人群AS的易感性高度相關(guān)。進(jìn)一步在多種族中驗(yàn)證這種相關(guān)性對(duì)于下一步針對(duì)這四個(gè)基因開展深入研究

4、非常必要，我國(guó)尚無這方面的報(bào)道。
　　 AS的臨床和病理表現(xiàn)與患者體內(nèi)免疫功能的失衡密切相關(guān)。近年來，IL23/Th17/IL17軸在AS中的作用受到越來越多的關(guān)注，其中強(qiáng)致炎因子IL17是炎癥效應(yīng)的關(guān)鍵，也是最終環(huán)節(jié)。IL17由輔助性T細(xì)胞亞群（helper T cells，Th）亞群Th17細(xì)胞產(chǎn)生。JAK（Janus kinase）2和STAT（signal transducer and activator of tran

5、scription）3在幼稚的T細(xì)胞向Th17細(xì)胞的分化中發(fā)揮關(guān)鍵作用。此外，JAK2還是“IL23通路”基因網(wǎng)絡(luò)的成員。有研究證實(shí)JAK2和STAT3與炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）的易感性相關(guān)，而IBD與AS不僅在臨床上緊密相關(guān)，易感基因也可能存在重疊。因此JAK2和STAT3基因多態(tài)性與AS也可能存在關(guān)聯(lián)。
　　 本研究擬在中國(guó)漢族人群中驗(yàn)證ERAP1、ANTXR2、IL1R2和

6、IL23R多態(tài)性與AS發(fā)病的相關(guān)性，同時(shí)鑒定JAK2和STAT3多態(tài)性與AS易感性之間是否關(guān)聯(lián)。具體分為以下兩個(gè)部分：
　　 笫-部分：ERAP1、ANTXR2、ILlR2、IL23R多態(tài)性在中國(guó)漢族人群中與AS發(fā)病的關(guān)聯(lián)研究
　　 目的：研究中國(guó)漢族人群中ERAP1、ANTXR2、IL1R2、IL23R多態(tài)性與AS發(fā)病之間的關(guān)聯(lián)性。
　　 材料及方法：按照1984年修訂的紐約標(biāo)準(zhǔn)，從門診及住院患者中共收集中國(guó)漢

7、族AS患者200例及對(duì)照200例。每位研究對(duì)象用抗凝管采集靜脈血2ml，AxyPrep血基因組DNA小量試劑盒提取DNA，利用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF）基因分型技術(shù)對(duì)病例及對(duì)照血樣ERAP1、ANTXR2、IL1R2、IL23R基因共14個(gè)SNP進(jìn)行檢測(cè)。14個(gè)SNP均為選自與高加索人群AS患者易感性相關(guān)的位點(diǎn)。等位基因頻率、基因型頻率在病例組和對(duì)照組之間的相對(duì)危險(xiǎn)度和95％置信區(qū)間等數(shù)據(jù)采用Plink軟件系

8、統(tǒng)進(jìn)行。單倍型分析使用Haploview 4.1完成。
　　 結(jié)果：14個(gè)SNP以及基因型在病例組和對(duì)照組中的分布均無顯著性差異（P>0.05）。其中rs11209026在所有研究對(duì)象中均不具備多態(tài)性。
　　 結(jié)論：ERAP1、ANTXR2、IL1R2、IL23R多態(tài)性在中國(guó)漢族人群中與AS的易感性無關(guān)。本研究的結(jié)果與高加索人群AS的相關(guān)性研究結(jié)果截然相反，進(jìn)一步證明了同種疾病在不同人種之間的遺傳背景和易感基因均存在差異

9、，提示復(fù)雜多基因疾病的遺傳學(xué)研究在設(shè)計(jì)時(shí)上應(yīng)嚴(yán)格考慮人群分層。
　　 第二部分：JAK2和STAT3多態(tài)性與AS易感性的相關(guān)性研究
　　 目的：研究JAK2和STAT3與AS易感性是否相關(guān)。
　　 材料及方法：根據(jù)修訂紐約標(biāo)準(zhǔn)，收集中國(guó)漢族AS患者200例及對(duì)照200例。MALDI-TOF技術(shù)對(duì)JAK2和STAT3基因的10個(gè)SNP進(jìn)行檢測(cè)。其中7個(gè)為利用SNP Brower 3.5軟件基于pairwise r2

10、法篩選出JAK2和STAT3基因中r2<0.85、最小等位基因頻率（minor allelic frequency，MAF）大于0.3的標(biāo)簽SNP，另外3個(gè)為文獻(xiàn)中與IBD相關(guān)的SNP。Haploview4.1進(jìn)行單倍型分析。Plink軟件完成多態(tài)性、單倍型及其與AS相對(duì)危險(xiǎn)度和95％置信區(qū)間等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：10個(gè)SNP位點(diǎn)及基因型在病例組和對(duì)照組之間的分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。單倍體分析顯示，位于JAK