高壓氧與高濃度氧對(duì)不同日齡新生大鼠眼和肺毒性的區(qū)別.pdf

1、研究背景:已經(jīng)知道,高濃度氧(high-concentration oxygen,HO),對(duì)新生動(dòng)物的眼和肺有毒性作用,即可引起早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變(retinopathy of prematurit,ROP)和支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)。高壓氧(hyperbaric oxygenation,HBO)同樣屬于高濃度氧,但經(jīng)文獻(xiàn)復(fù)習(xí),用常規(guī)條件的HBO治療缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-

2、ischemic brain damage,HIBD)并不導(dǎo)致新生兒和新生動(dòng)物的ROP和BPD。HBO和HO對(duì)正常的新生大鼠的毒性作用有否區(qū)別,尚未見到報(bào)道。弄清楚兩者之間的區(qū)別及其機(jī)制將有助于臨床將HBO更好地用于新生兒腦損傷的治療。
　　目的:觀察HBO與HO對(duì)不同日齡正常新生大鼠視網(wǎng)膜和肺組織的毒性作用以及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)表達(dá)的變化.
　　

3、方法:1.動(dòng)物分組及處理:將3日齡和7日齡的Sprague-Dawley大鼠(性別隨機(jī))隨機(jī)分為以下6組:3日齡正常對(duì)照組(CON-3),3日齡高濃度氧組(HO-3),3日齡高壓氧組(HBO-3),7日齡正常對(duì)照組(CON-7),7日齡高濃度氧組(HO-7),7日齡高壓氧組(HBO-7)。HBO組給予高壓氧(2.0ATA)處理,每日一次,連續(xù)7d后在常壓空氣下飼養(yǎng);HO組給予高濃度氧處理(氧濃度為90％),連續(xù)7d后在常壓空氣下飼養(yǎng);正

4、常對(duì)照組不予任何干預(yù)。模型成功后于鼠齡21d處死所有大鼠。
　　2.墨汁染色視網(wǎng)膜鋪片觀察視網(wǎng)膜新生血管;眼球及肺組織病理學(xué)檢查:6組大鼠眼球及肺組織做HE染色,光鏡下觀察眼球視網(wǎng)膜增生血管芽數(shù),肺組織形態(tài)學(xué)變化;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的免疫組化:觀察視網(wǎng)膜及肺組織VEGF的表達(dá)情況并行半定量分析;肺組織細(xì)胞凋亡(TUNEL)檢測(cè)并定性分析。
　　結(jié)果:CON-3組,CON-7組視網(wǎng)膜血管新生血管芽細(xì)胞核計(jì)數(shù)平均分別為

5、19.0±4.8個(gè),20.1±8.0個(gè),HBO-3組為23.6±6.8個(gè),HO-3組為82.4±15.4個(gè),HBO-7組為20.9±7.8個(gè),HO-7組為68.8±12.7個(gè)。與同日齡CON組相比,HBO組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05;HO組新生血管細(xì)胞核增多,差異有非常顯著意義,P<0.005;不同日齡HO組比較,P=0.009,HO-3組新生血管細(xì)胞增生較HO-7組明顯。視網(wǎng)膜鋪片顯示HBO組較CON組無明顯血管增生現(xiàn)象,而HO組

6、視網(wǎng)膜血管明顯增生。視網(wǎng)膜VEGF免疫組化可見CON-3組,CON-7組,HBO-7組均有微弱表達(dá),而HBO-3組,HO-3組,HO-7組則明顯表達(dá),差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.001。肺組織HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察;HBO組與正常對(duì)照組基本相同,為正常肺結(jié)構(gòu)。而不同日齡HO組肺泡樣結(jié)構(gòu)不規(guī)則,大量肺泡融合萎縮,肺泡數(shù)量減少,肺間隔增厚,少量膠原沉積及成纖維組織增生。肺組織VEGF免疫組化可見不同日齡CON組,HBO組表達(dá)無明顯差異;與C

7、ON組比較,HO組肺組織VEGF表達(dá)減少,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;不同日齡之間比較,HO-3組肺組織VEGF表達(dá)減少較HO-7組明顯,P<0.05。肺組織TUNEL結(jié)果顯示HO組可見大量凋亡細(xì)胞,HBO-3有部分凋亡細(xì)胞可見,HBO-7組同CON組無明顯差別。
　　結(jié)論:HO有刺激正常新生大鼠視網(wǎng)膜血管增生和肺組織損傷作用,而HBO無此種作用,其原因可能和VEGF的表達(dá)有關(guān);動(dòng)物出生后越早給予HO干預(yù),其新生大鼠視網(wǎng)膜血管增生