成骨生長肽抗體的制備及其對NIH3T3細(xì)胞促增殖作用機(jī)理.pdf

1、成骨生長肽(OGP)是從損傷后再生的骨髓培養(yǎng)基質(zhì)中分離純化所得的一種具有14個氨基酸的小分子多肽。OGP廣泛存在于哺乳動物的血清中，進(jìn)化上高度保守，因此具有很好的同源性。研究發(fā)現(xiàn)OGP及其C端5肽可以促進(jìn)造骨和造血作用。對體外培養(yǎng)的MC3T3E1成骨細(xì)胞、NIH3T3成纖維細(xì)胞和成骨性Ros17/2細(xì)胞等均有促增殖和分化作用。但目前，OGP的細(xì)胞作用機(jī)理還不明確。為此，本實(shí)驗(yàn)采用中科院生化所人工合成的sOGP，設(shè)計(jì)poly-OGP制備O

2、GP抗體，觀察sOGP對NIH3T3細(xì)胞的促增殖作用，并利用制備抗體的免疫分析法及其他技術(shù)探討OGP及其C端5肽對NIH3T3細(xì)胞的增殖作用機(jī)理。通過實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論：Ploy-OGP免疫動物可以得到更單一及成本更低廉的抗血清。MTT法和細(xì)胞計(jì)數(shù)法是較好的測定增殖的方法。細(xì)胞周期分析及Ⅰ型膠原RT-PCR法及ELISA法測定，可以提供更多的增殖信息。sOGP(14肽及5肽)可在低濃度下通過對OGP的正反饋?zhàn)饔么龠M(jìn)NIH3T3細(xì)胞增殖。OG