人工蕁麻疹患者血漿中神經(jīng)肽Y和外周血中嗜堿性粒細(xì)胞表面CD63的檢測(cè)及意義.pdf

1、目的:
　　 本研究應(yīng)用放射免疫法和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)24例人工蕁麻疹患者和16例正常人血漿中神經(jīng)肽Y和外周血中嗜堿性粒細(xì)胞表面的CD63進(jìn)行檢測(cè)，探討神經(jīng)肽Y和嗜堿性粒細(xì)胞在人工蕁麻疹發(fā)病機(jī)制中的作用及意義。
　　 人工蕁麻疹(UrticariaFactitia)又名皮膚劃痕癥，是指搔抓或用鈍性物體在皮膚上輕壓劃過，數(shù)分鐘后沿抓痕或劃線出現(xiàn)的條狀風(fēng)團(tuán)樣隆起，部分病人伴瘙癢，不久即消退。其發(fā)病原因和發(fā)病機(jī)制至今仍尚不明確，大多

2、數(shù)學(xué)者認(rèn)為其與真菌及其代謝產(chǎn)物、系統(tǒng)性疾病如甲狀腺功能異常、糖尿病、疥蟲感染、懷孕等有關(guān);也有研究認(rèn)為精神、心理因素在該病的發(fā)病進(jìn)程中起重要作用。人工蕁麻疹是皮膚科的常見病，其病程遷延，易反復(fù)發(fā)作，致使患者生活質(zhì)量受到嚴(yán)重影響。近年來，關(guān)于人工蕁麻疹發(fā)病機(jī)制方面的研究報(bào)道并不多，部分人工蕁麻疹患者接觸變應(yīng)原（屋塵螨和粉塵螨）后可發(fā)病，表明在人工蕁麻疹發(fā)生過程中過敏因素可能起著一定的作用;另外有研究提示精神心理因素與人工蕁麻疹的發(fā)病也有一

3、定的關(guān)系。在過敏性疾病發(fā)生時(shí)，周圍的神經(jīng)末梢可被許多物質(zhì)包括多種變應(yīng)原、組胺、白三烯、前列腺素刺激釋放神經(jīng)肽[1]，而神經(jīng)肽Y是神經(jīng)肽的一種，是人體中含量最豐富的神經(jīng)肽之一。近年來發(fā)現(xiàn)神經(jīng)肽Y參與多種精神科常見疾病的產(chǎn)生機(jī)制，也有研究發(fā)現(xiàn)憂郁、緊張、焦慮、負(fù)性生活事件刺激、時(shí)間緊迫感、爭(zhēng)強(qiáng)好勝、生活規(guī)律重大變動(dòng)、工作學(xué)習(xí)壓力大等精神心理因素與人工蕁麻疹的發(fā)病有一定關(guān)系[2-4]。嗜堿性粒細(xì)胞是過敏反應(yīng)的主要效應(yīng)細(xì)胞之一，活化的嗜堿性粒細(xì)

4、胞在過敏反應(yīng)中脫顆粒釋放如肝素、組胺等其他活性介質(zhì)。CD63是嗜堿性粒細(xì)胞組胺顆粒囊泡膜表面的重要標(biāo)志，當(dāng)嗜堿性粒細(xì)胞活化并釋放出顆粒時(shí)，CD63分子轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜表面，所以CD63被認(rèn)為是活化的嗜堿性粒細(xì)胞的重要標(biāo)志物[5-6]。
　　 本課題旨在神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)學(xué)說的指導(dǎo)下，探討神經(jīng)肽Y和嗜堿性粒細(xì)胞在人工性蕁麻疹發(fā)病機(jī)制中的作用及意義。
　　 方法:
　　 實(shí)驗(yàn)組24例病例均來自2011年8月至2011

5、年12月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院皮膚科門診人工蕁麻疹患者，發(fā)病時(shí)間5天～8年。入組標(biāo)準(zhǔn):①依據(jù)吳志華主編《皮膚性病學(xué)》一書中所確定的人工蕁麻疹的診斷標(biāo)準(zhǔn):指瘙抓或用鈍器劃皮膚后，在該處很快形成與抓痕或劃痕一致的風(fēng)團(tuán)，即皮膚劃痕征(Dermographism)陽性，具體的標(biāo)準(zhǔn)化方法如下:用球面直徑0.8～1.0cm的劃痕器械（廢舊圓珠筆芯即可）在前臂屈側(cè)無皮疹處，以50克左右的壓力(筆尖壓低皮膚約0.5cm)和1.0cm/s的劃速劃痕，劃后觀

6、察15min左右②受試對(duì)象在1個(gè)月內(nèi)不能使用過免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素類藥物，1周內(nèi)不能使用過任何抗組胺藥物③受試對(duì)象不能合并其他過敏性疾病、自身免疫性疾病和腫瘤性疾病等，所有女性患者皆處于非妊娠期或非哺乳期。正常對(duì)照組16例，是在年齡、性別等方面均與病例組相匹配的同期健康者。檢測(cè)神經(jīng)肽Y的試劑為碘(125I)神經(jīng)肽Y放射免疫分析藥盒，用放射免疫法(RIA)檢測(cè);CD63的檢測(cè)用CD45-PERCP/CD203c-PE/CD63-FITC

7、三聯(lián)抗體標(biāo)記嗜堿性粒細(xì)胞，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)CD63的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)的每個(gè)步驟皆嚴(yán)格按照說明書操作。統(tǒng)計(jì)分析方法:數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行處理，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組數(shù)據(jù)首先經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布的一組采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示;不符合正態(tài)分布的一組用中位數(shù)/四分位數(shù)間距表示，采用非參數(shù)檢驗(yàn)中的Mann-Whitney檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果:
　　 1、神經(jīng)肽Y的檢測(cè)結(jié)果:該組數(shù)據(jù)首先經(jīng)正

8、態(tài)性檢驗(yàn)，是服從正態(tài)分布的（P=0.2＞0.1），結(jié)果用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。人工蕁麻疹組和健康對(duì)照組血漿中神經(jīng)肽Y的含量分別是111.155±36.832(pg/ml)和103.456±44.697(pg/ml)，再采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果示兩組無明顯差別，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.556＞0.05)。
　　 2、嗜堿性粒細(xì)胞表面CD63的檢測(cè)結(jié)果:該組數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)后是不服從正態(tài)分布的(P=0.003＜0.1)，結(jié)果用中位數(shù)

9、/四分位數(shù)間距表示。人工蕁麻疹組和健康對(duì)照組外周血中細(xì)胞膜表面表達(dá)CD63的嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)分別是280.5/176.7、18.1/33.5，再采用非參數(shù)檢驗(yàn)中的Mann-Whitney檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果示兩組在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P=0.000＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 人工蕁麻疹組與正常對(duì)照組血漿中神經(jīng)肽Y含量測(cè)量值統(tǒng)計(jì)結(jié)果示兩組無明顯差別，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示神經(jīng)肽Y與人工蕁麻疹發(fā)病過程的關(guān)系尚未確定，有待進(jìn)一步