基于超高效液相色譜-質(zhì)譜的疾病代謝組學(xué)研究.pdf

1、廈門大學(xué)博士后學(xué)位論文基于超高效液相色譜-質(zhì)譜的疾病代謝組學(xué)研究姓名：張潔申請學(xué)位級別：博士后專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：杭緯;顏曉梅20090401A b s t r a c tM e t a b o n o m i c si s g a i n i n gi n c r e a s i n gi n t e r e s t i nm a n yf i e l d s r e c e n t l y , w h i c hi s a l

2、li m p o r t a n tc o m p o n e n t o f t h ef u n c t i o ng e n o m i c s a n d s y s t e m sb i o l o g y ．A sa d e v e l o p i n ga n dv a l u a b l e t o o l f o r t h em e t a b o l o m i c s a n a l y s i s o fc o

3、 m p l e xs a m p l e s ，u l t r a - h i g hp e r f o r m a n c e l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y ( U P L C ) i sg a i n i n gm o r ea t t e n t i o n ．F o c u s i n go nU P L C ／M S ，t h e f o l l o w i n g w o r

4、 k i nt h i st h e s i sh a s b e e n c a r d e d o u t ．胎d e v e l o p e dm e t a b o n o m i c sm e t h o dt o d i s t i n g u i s ht h eg l o b a ls e r u mp r o f i l e so f8d i a b e t i cn e p h r o p a t h y ( D N

5、 ) p a t i e n t s ，3 3 t y p e2 d i a b e t e sm e l l i t u s ( T 2 D M ) p a t i e n t sa n d2 5h e a l t h yv o l u n t e e r su s i n gU P L C ／M Ss y s t e m ．T h ed i s t i n c t c l u s t e r i n gb e t w e e n t

6、 h ep a t i e n t sa n d c o n t r o l sw a s o b s e r v e d ，a n dD N a n d T 2 D M p a t i e n t sw e r ea l s os e p a r a t e di n t ot w o i n d i v i d u a l g r o u p s ．S e v e r a lc o m p o u n d sw e r et e n

7、 t a t i v e l yi d e n t i f i e db a s e d o na c c u r a t e m a s s ，i s o t o p i c p a t t e r n a n d M S ／M Si n f o r m a t i o n ．I n a d d i t i o n , s i g n i f i c a n tc h a n g e s i nt h es e r t l n l l

8、 e v e lo f l e u c i n e , d i h y d r o s p h i n g o s i n e a n d p h y t o s h p i n g o s i n e w e r en o t e d ，i n d i c a t i n gt h e p e r t u r b a t i o n s o fa m i n o a c i d m e t a b o l i s m a n d p

9、h o s p h o l i p i dm e t a b o l i s m i n d i a b e t i cd i s e a s e s ，w h i c hh a v i n gi m p l i c a t i o n si nc l i n i c a ld i a g n o s i sa n dt r e a t m e n t ．W e a p p l i e dU P L C ／M Si nt h em e

10、t a b o n o r n i c sr e s e a r c ho fp r o s t a t ed i s e a s e si n c l u d i n gp r o s t a t i cC a n C e r ( P C ) a n d p r o s t a t i c h y p e r p l a s i a ( P H ) ．T h ed i s t i n c t c l u s t e r i n go

11、fP Cp a t i e n t s ，P H p a t i e n t s a n d t h e c o n t r o l s w a so b s e r v e d ．P E ( 2 2 ：6 ) ，L y s o P C ( 1 8 ：0 ) ，L y s o P C ( 2 2 ：6 ) ，p h y t o s p h i n g o s i n e , d i h y d r o c e r a m i d ea

12、n dc e r a m i d ew e r et e n t a t i v e l yi d e n t i f i e da sp o t e n t i a lm a r k e r s b a s e d o n a c c u r a t em a s s a n d i s o t o p i cp a t t e r n ．I nU P L C —b a s e d m e t a b o n o m i c sr e

13、 s e a r c h , t h ei n t r o d u c t i o no f s e p a r a t i o ns t e pp r o l o n g st h e t o t a l a n a l y s i st i m e , c o n s e q u e n t l yr e s u l t i n gi nr e l a t i v e l y l o w e rt h r o u g h p u t

14、 ．W ea n a l y z e d t h e s e r u n la n d u r i n eo ft h ep a t i e n t s 、加Ⅱlt y p e2d i a b e t e sm e l l i t u sa n dt h ec o n t r o l sw i m U P L C ／T O F - M S ，c o m p a r i n g f a s tg r a d i e n tw i t hs

15、 l o wg r a d i e n t , u s i n g b o n lp o s i t i v ea n d n e g a t i v ei o n i z a t i o nm o d e s ．I nb o t hf a s ta n d s l o w g r a d i e n t s ，t h eP L S - D Am o d e l s g e n e r a t e d 謝ms e r u m s a m

16、 p l e sw e r e m o r e r o b u s t t h a nt h o s e 麗n l u r i n es a m p l e s ，a n d p o s i t i v e i o n i z a t i o n m o d e d e m o n s t r a t e d b e t t e r d i f f e r e n t i a t i o n a n d h i g h e rc l a

17、 s s i f i c a t i o nr a t et h a nn e g a t i v ei o n i z a t i o nm o d e ．I na d d i t i o n , t h ef a s t g r a d i e n tw a sf o u n dt oh a v ec o m p a r a b l e d i f f e r e n t i a t i o nc a p a b i l i t y