氟西汀對(duì)大鼠海馬抑制性神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié).pdf

1、氟西汀是一種五羥色胺重?cái)z取抑制劑，目前被廣泛應(yīng)用于抑郁癥的治療。然而它的抗抑郁機(jī)制至今仍未完全清楚。以前的研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者和動(dòng)物模型腦內(nèi)的GABA濃度水平會(huì)出現(xiàn)明顯的下調(diào)，使用抗抑郁藥包括氟西汀治療后GABA濃度的下調(diào)能得以明顯的恢復(fù)。同時(shí)，大量研究表明GABA能激動(dòng)劑具有很好的抗抑郁效應(yīng)。這就引出了抑郁癥的GABA能假說。該假說認(rèn)為抑郁癥的產(chǎn)生與腦內(nèi)GABA濃度的下調(diào)有關(guān)，通過恢復(fù)GABA濃度水平可以起到一定的治療作用。然而，此前的

2、研究都沒直接檢測(cè)氟西汀對(duì)GABA的神經(jīng)突觸釋放的影響。 盡管氟西汀是目前臨床上應(yīng)用非常廣泛的抗抑郁藥，但它也會(huì)產(chǎn)生很多副作用。高濃度的氟西汀治療可伴發(fā)驚厥反應(yīng)，同時(shí)在臨床治療濃度下也會(huì)引起驚厥反應(yīng)。這種副作用的產(chǎn)生機(jī)制一直少有研究。盡管氟西汀可以顯著增強(qiáng)GABA受體的活性和抑制NMDA受體的活性，但這些調(diào)節(jié)都無法解釋驚厥反應(yīng)產(chǎn)生的原因。而甘氨酸受體作為腦內(nèi)的一種介導(dǎo)抑制性活性的重要受體，卻一直未被當(dāng)作潛在的作用靶點(diǎn)進(jìn)行研究。

3、 本文主要應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗的技術(shù)，研究氟西汀對(duì)大鼠海馬抑制性神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，包括對(duì)GABA能突觸傳遞和突觸后甘氨酸受體的調(diào)節(jié)，以期能在一定程度上解釋氟西汀在治療過程中產(chǎn)生的抗抑郁效應(yīng)及其副作用－驚厥反應(yīng)。 1.氟西汀增強(qiáng)大鼠海馬神經(jīng)元GABA能抑制性突觸后電流 在此項(xiàng)研究中，我們研究了氟西汀對(duì)GABA能抑制性突觸傳遞的調(diào)節(jié)。我們發(fā)現(xiàn)，自發(fā)抑制性突觸后電流可以被10μMbicuculline完全抑制，說明這些記錄到的電

4、流都是GABA能電流。30μM氟西汀可逆的增強(qiáng)GABA能抑制性突觸后電流。氟西汀對(duì)抑制性突觸后電流的幅度和頻率的增強(qiáng)作用具有濃度依賴性，其半效增強(qiáng)濃度分別為10.96和14.26μM。TTX不影響氟西汀對(duì)GABA能抑制性突出后電流的增強(qiáng)效應(yīng)，提示這種增強(qiáng)作用不依賴于突觸前的動(dòng)作電位。同時(shí)，5-HT2受體的選擇性抑制劑ritanserin(5μM)也不影響氟西汀對(duì)微小抑制性突觸后電流的增強(qiáng)效應(yīng)。綜上所述，氟西汀可以顯著增強(qiáng)GABA能神經(jīng)遞

5、質(zhì)傳遞，這種增強(qiáng)不依賴于突觸前動(dòng)作電位以及它對(duì)5-HT2受體活性的調(diào)節(jié)。氟西汀的增強(qiáng)作用可能代償抑郁癥過程中海馬組織GABA遞質(zhì)的缺失，并在一定程度上參與它的抗抑郁作用。 2.氟西汀抑制大鼠海馬神經(jīng)元甘氨酸受體的活性 在此項(xiàng)研究中，我們檢測(cè)了氟西汀對(duì)甘氨酸受體活性的調(diào)節(jié)。我們發(fā)現(xiàn)氟西汀及其活性代謝產(chǎn)物去甲氟西汀可以顯著抑制培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元中甘氨酸誘導(dǎo)的電流。這種抑制效應(yīng)具有濃度依賴性和非電壓依賴性。氟西汀可以使得甘氨

6、酸的濃度效應(yīng)曲線右移，但不影響甘氨酸誘發(fā)的最大電流。Lineweaver-Burk和Schild擬合分析都提示這種調(diào)節(jié)屬于競爭性抑制。在利用picrotoxin選擇性抑制同聚體甘氨酸受體活性后，氟西汀的抑制幅度能得到顯著的增強(qiáng)。在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的HEK293T上，氟西汀顯著抑制α2β異聚體甘氨酸受體介導(dǎo)的電流，但不影響α2同聚體甘氨酸受體的電流。這些結(jié)果提示氟西汀是甘氨酸受體的競爭性和亞型選擇性抑制劑，這可能一定程度上解釋了它導(dǎo)致驚厥反應(yīng)的機(jī)