藏東南地區(qū)土壤放線菌資源調查及應用研究.pdf

1、本研究從藏東南的林芝、色季拉山、米林、貢布江達和米拉山等地，以原始森林、高山草甸、沼澤、糧田、保護地、荒地、沼澤、耕作草甸土和亞高山草甸等土壤類型為對象，采集不同植被、不同海拔高度土樣50份，用多種培養(yǎng)基分離中、低溫放線菌，并對放線菌的數(shù)量、組成、生理生化特性以及它們的拮抗性等進行了研究。按放線菌的形態(tài)學特征鑒定到屬，鏈霉菌鑒定到類群。對高活性菌株進行盆栽試驗、菌種鑒定、發(fā)酵條件的研究與優(yōu)化、抗菌譜測定及致病機理研究，取得了重要的研究結

2、果： 1.藏東南土壤放線菌的區(qū)系研究。用5種培養(yǎng)基分離純化出564株放線菌，按常規(guī)方法鑒定到屬(鏈霉菌到類群)。結果表明：(1)藏東南土壤放線菌的數(shù)量隨生境不同而變化。各樣區(qū)的中溫菌數(shù)量明顯多于低溫菌，對中溫菌，高氏一號培養(yǎng)基所測數(shù)量高于甘油精氨酸培養(yǎng)基，對低溫菌，土壤浸汁培養(yǎng)基所測的菌數(shù)高于葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基。中溫放線菌數(shù)量以糧田＞荒地＞次生林＞保護地＞原始森林＞耕作草甸＞亞高山草甸＞沼澤＞高山草甸，其數(shù)量依次為1553.1

3、×103、1479.3×103、1473.3×103、820.0×103、536.7×103、184.3×103、19.5×103、9.0×103和4.8×103個/g干土。(2)從藏東南各樣區(qū)土壤中分離到的放線菌有9個屬，分別歸屬為鏈霉菌屬、諾卡氏菌屬、游動放線菌屬、間孢囊菌屬、束絲放線菌屬、小多孢菌屬、小單孢菌屬、糖多孢菌屬、鏈孢囊菌屬。糧田最多，分離到7個屬，耕作草甸土最少，只分離到2個屬。在糧田中分離到束絲放線菌屬，該屬菌在國內

4、屬首次報道。鏈霉菌分離到12個類群，鏈霉菌的類群在各樣區(qū)分布不同，但均以灰褐類群和白孢類群占優(yōu)勢。該區(qū)鏈霉菌平均占放線菌總數(shù)的90.5％，平均分離到9個類群。 2.土壤放線菌的生理生化試驗結果表明：分別有58.7％和72.0％的中溫放線菌能利用明膠和產生凝乳酶。這些放線菌水解淀粉和酪素的能力較弱，分別為22.7％和25.3％。3.拮抗性放線菌的篩選研究結果表明：(1)拮抗菌在9個樣區(qū)中均有分布，拮抗菌的分布與各樣區(qū)放線菌的數(shù)量無

5、相關性。在564株供試放線菌中，66.1％的菌株具有抗菌活性。原始森林土壤中的拮抗性放線菌百分率最高，為84.0％。原始森林放線菌數(shù)量雖少，但拮抗性放線菌的百分率卻較高。這不僅對原始森林中土傳病害的防治有重要意義，而且提供了從原始森林土壤中可以篩選到更多拮抗性放線菌的重要信息。(2)分別有29.6％，49.8％，41.3％，32.4％，40.2％，44.0％的菌株對大腸桿菌、枯草桿菌、辣椒疫霉、南瓜枯萎菌、番茄早疫菌和蘋果炭疽菌有拮抗性

6、?？辜毦陌俜致蕿?1.6％，抗真菌的百分率為62.8％，說明藏東南土壤放線菌中抗G+菌放線菌多于抗G-菌放線菌，抗真菌放線菌多于抗細菌放線菌。(3)番茄早疫病拮抗菌的篩選。通過皿內瓊脂塊、皿內發(fā)酵液和溫室盆栽試驗表明：菌株10-4為一株高活性菌株。(4)菌株10-4經形態(tài)學特征、培養(yǎng)特征、生理生化特性和16SrDNA綜合特征進行鑒定，初步鑒定為鏈霉菌屬球孢類群。(5)菌株10-4是一株廣譜拮抗菌，對20種植物病原真菌及2種細菌均有具有