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文檔簡介
1、第一部分
老年人熱休克蛋白60及抗體與冠心病和牙周炎關(guān)系的研究
目的:研究老年人熱休克蛋白60(HSP60)、熱休克蛋白60IgG(HSP60IgG)和牙齦卟啉單胞菌熱休克蛋白60IgG(P.gHSP60IgG)與冠心病及牙周炎之間的關(guān)系,為了解冠心病新的危險因素提供理論依據(jù)。
方法:入選2012年9-10月天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院老干部查體患者共160例,分為四組,即健康對照組、冠心病組、牙周炎組
2、、冠心病合并牙周炎組,每組各40例,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定各組HSP60、HSP60IgG、P.gHSP60IgG的濃度,同時完善一般生化指標(biāo)如肝腎功能、血脂等的檢查。
結(jié)果:1.冠心病組、牙周炎組、冠心病合并牙周炎組人HSP60、人HSP60IgG、P.gHSP60IgG濃度明顯高于健康對照組(P<0.05),冠心病合并牙周炎組上述指標(biāo)亦高于冠心病組和牙周炎組,牙周炎組P.gHSP60IgG濃度顯著高于冠心病
3、組(P<0.05),但冠心病和牙周炎組人HSP60、人HSP60IgG濃度無明顯差異(P>0.05)。
2.冠心病組女性HSP60濃度明顯高男性(P<0.05),牙周炎組女性P.gHSP60IgG濃度明顯高于男性(P<0.05),冠心病合并牙周炎組女性HSP60IgG、P.gHSP60IgG濃度亦明顯高于男性(P<0.05)。
3.各組間人HSP60、人HSP60IgG和P.gHSP60IgG濃度隨年齡增加有
4、逐漸升高的趨勢,其中以80歲為界限,冠心病組、牙周炎組和冠心病合并牙周炎組≥80歲患者人HSP60濃度比<80歲患者明顯升高(P<0.05),冠心病合并牙周炎組≥80歲患者人HSP60IgG和P.gHSP60IgG濃度比<80歲患者明顯升高(P<0.05),牙周炎組≥80歲患者P.gHSP60IgG濃度比<80歲患者有所升高,但無顯著性差異(P>0.05)。
4.隨著體重指數(shù)(BMI)的升高各組間人HSP60、人HSP60
5、IgG、P.gHSP60IgG濃度逐漸升高,冠心病合并牙周炎組BMI≥30超重患者人HSP60、人HSP60IgG濃度較其他各組超重患者明顯升高(P<0.05)。
5.冠心病合并牙周炎組吸煙患者人HSP60濃度明顯高于非吸煙患者(P<0.05),但其他各組顯示吸煙對人HSP60、人HSP60IgG和P.gHSP60IgG濃度影響不大(P>0.05)。
6.飲酒對冠心病組、牙周炎組、冠心病合并牙周炎組人HSP6
6、0、人HSP60IgG影響較大,飲酒組的人HSP60、人HSP60IgG均明顯高于非飲酒組(P<0.05)。
7.冠心病合并牙周炎組血脂水平低于其他各組,但人HSP60、人HSP60IgG和P.gHSP60IgG水平卻明顯升高(P<0.05)。
8.經(jīng)偏相關(guān)分析顯示:在控制年齡、身高、體重、吸煙史、飲酒、甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇等因素后,人HSP60和人HSP60IgG呈正相關(guān)(r=0.705,P
7、<0.01),P.gHSP60IgG和人HSP60IgG呈正相關(guān)(r=0.825,P<0.01)。
9.校正傳統(tǒng)的危險因素,年齡、性別、吸煙狀態(tài)、BMI后,經(jīng)多元Logistic回歸分析顯示:P.gHSP60IgG和人HSP60IgG是CHD的危險因素之一(P<0.05)。
結(jié)論:人HSP60及人HSP60IgG、P.gHSP60IgG可能在冠心病和牙周炎之間起一定的橋接作用,患牙周炎的老年人可能更易發(fā)生冠心
8、病,除了結(jié)合心電圖、臨床癥狀和冠脈造影檢查可明確外,適時測定人HSP60、人HSP60IgG和P.gHSP60IgG濃度可能對評估牙周炎患者是否易于合并冠心病有指導(dǎo)意義,因此老年人注意牙周衛(wèi)生、及時治療牙周炎可能有助于預(yù)防冠心病。
第二部分
牙齦卟啉單胞菌熱休克蛋白60干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的研究
目的:觀察牙齦卟啉單胞菌熱休克蛋白60(P.gHSP60)以不同濃度及時間干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HU
9、VEC)后,HUVEC表達(dá)內(nèi)皮型鈣粘蛋白(VE-cadherin)、一氧化氮合酶(eNOS)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的變化及細(xì)胞增殖和凋亡的趨勢,明確P.gHSP60致HUVEC功能障礙的具體機制。
方法:P.gHSP60分別以10pg/mL、100pg/mL、1ng/mL不同濃度干預(yù)HUVEC后,在2小時、6小時、12小時、24小時用Westernbloting、PCR、MTT比色法和Annex
10、inV-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)等方法從細(xì)胞蛋白表達(dá),基因表達(dá)及細(xì)胞增殖和凋亡各層面了解HUVEC功能障礙及增殖與凋亡的情況。
結(jié)果:1.P.gHSP60以10pg/mL濃度干預(yù)HUVEC時,各種蛋白表達(dá)量隨時間變化未見明顯變化;P.gHSP60以100pg/mL濃度干預(yù)HUVEC時,VE-鈣粘蛋白、eNOS蛋白在干預(yù)24小時表達(dá)開始減少,Caspase-3蛋白表達(dá)開始增加;P.gHSP60濃度加大至1ng/mL干預(yù)
11、HUVEC后6小時即誘導(dǎo)VE-鈣粘蛋白、eNOS蛋白表達(dá)減少,Caspase-3及其活性形式蛋白表達(dá)增加。P.gHSP60干預(yù)HUVECVE-鈣粘蛋白、eNOS蛋白表達(dá)呈濃度和時間依賴性方式降低,Caspase-3蛋白表達(dá)則呈相反趨勢。
2.P.gHSP60以10pg/mL濃度干預(yù)HUVEC時,VE-鈣粘蛋白mRNA表達(dá)量隨時間變化未見明顯變化;P.gHSP60以100pg/mL濃度干預(yù)HUVEC時,VE-鈣粘蛋白mRNA
12、表達(dá)在干預(yù)12小時開始降低,當(dāng)P.gHSP60濃度加大至1ng/mL干預(yù)HUVEC后6小時即誘導(dǎo)VE-鈣粘蛋白mRNA表達(dá)減少,表現(xiàn)為濃度及時間依賴性方式改變。
3.P.gHSP60不同濃度干預(yù)HUVEC24小時,隨著濃度逐漸增加,細(xì)胞增殖能力逐漸降低。
4.P.gHSP60不同濃度干預(yù)HUVEC24小時,隨著濃度逐漸增加,細(xì)胞早期凋亡率逐漸增加。
結(jié)論:P.gHSP60干預(yù)HUVEC時,VE-
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