亞甲藍(lán)預(yù)防腸缺血再灌注后肺損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：將亞甲藍(lán)（MB）用于腸缺血再灌注后急性肺損傷的實(shí)驗(yàn)兔，觀察腸缺血再灌注過(guò)程中，兔血及肺組織中氧自由基及炎癥因子含量的變化與ALI損傷程度的相關(guān)性。探討亞甲藍(lán)的抗氧自由基損傷作用及抑制炎性反應(yīng)的可能機(jī)制，及對(duì)急性肺損傷的保護(hù)作用。
　　 方法：成年健康SD家兔（2.5～3.5g/只）24只，雄雌不限。每只經(jīng)耳緣靜脈注射1％戊巴比妥鈉（25～30mg/kg）麻醉后，開腹游離腸系膜上動(dòng)脈（SMA），用無(wú)損傷血管夾夾閉其根部，SM

2、A停止搏動(dòng)作為缺血成功的標(biāo)志，缺血持續(xù)1h。然后松夾進(jìn)行再灌注，系膜動(dòng)脈弓搏動(dòng)作為再灌注成功的標(biāo)志，繼續(xù)再灌注2h，制備腸缺血再灌注模型。
　　 按單盲法隨機(jī)分為3組，每組8只，即對(duì)照組（S組）：動(dòng)物進(jìn)行上述操作后，不夾閉腸系膜上動(dòng)脈，觀察2h；損傷組（I/R組）：夾閉腸系膜上動(dòng)脈1h，松夾再灌注2h；保護(hù)組（MB組）：于動(dòng)脈松夾即刻分別按10mg/kg靜脈給MB，1min內(nèi)注射完畢。分別于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物穩(wěn)定20min（基礎(chǔ)值）、松夾

3、前、再灌注2h取血2ml。開胸取左下肺葉肺組織約1g制成10％勻漿。全程監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓（MAP）、心率（HR）、呼吸頻率（R）變化，并記錄以上3個(gè)時(shí)點(diǎn)的值。
　　 每份標(biāo)小均用光譜分析法測(cè)血中丙二醛（MDA）、肺組織中超氧陰離子（O2-）、超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）和黃嘌吟氧化酶（XOD）；采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清白細(xì)胞介素-8（IL-8）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）值。
　　 所有計(jì)

4、量資料以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行檢驗(yàn)分析，組間比較采用單因素方差分析，組內(nèi)比較采用隨機(jī)設(shè)計(jì)方差分析檢驗(yàn)，分析比較各均數(shù)間的顯著性差異，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：腸缺血期備組MAP無(wú)顯著變化；再灌注2h后，I/R組MAP較基礎(chǔ)值明顯下降，從基礎(chǔ)的（92±17）mmHg降至（62±6.7）mmHg（P<0.01）；而MB組再灌注前后MAP有輕度改變，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。S組血中MD

5、A實(shí)驗(yàn)前后變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與S組比較，再灌注2h后，I/R組肺組織中O2-及血中MDA含量顯著增高，血中MDA由基礎(chǔ)值（1.75±1.0）mmol.gprot-1，增至（3.67±1.47）mmol.gprot-1（P<0.01）；同時(shí)CAT也有顯著增加跡象（P<0.01）。而MB組再灌注前后血中MDA增加無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。各組肺組織SOD和XOD活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與S組比較，I/R組血清FNF-α、IL-8濃度明顯升

6、高（P<0.01）；MB組雖有一定程度升高，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MB組與I/R組比較，血清TNF-α、IL-8濃度則明顯降低（P<0.05）。
　　 結(jié)論：再灌注前即刻靜脈注射亞甲藍(lán)10mg/kg，可減輕腸缺血再灌注兔肺損傷?？赡芘c其抑制氧自由基的生成及IL-8、TNF-α等前炎癥因子過(guò)度釋放，從而減輕了炎性反應(yīng)有關(guān)；此外，亞甲藍(lán)能防止外周血壓的下降，通過(guò)穩(wěn)定血液動(dòng)力學(xué)，有助于維持組織的灌注壓，從而保證充足的血氧供應(yīng)，也有助于減輕兔