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文檔簡介
1、目的: 1探討基因重組人粒細胞集落刺激因子(rhG-CSF商品名惠爾血)動員骨髓干細胞向缺血性腦梗死大鼠模型的遷移及其在特定的病理環(huán)境中分化的情況。 2 探討基因重組人粒細胞集落刺激因子動員骨髓干細胞治療大鼠缺血性腦梗死在形態(tài)和功能方面的改變,以觀察其保護神經(jīng)修復梗死的腦組織的治療作用。 方法:選擇符合實驗要求清潔級的SD大鼠,隨機分為治療組,對照組和假手術組,每組32只。治療組和對照組均用線栓法復制大鼠腦缺血模型,假手
2、術組僅暴露右側頸總動脈,頸內動脈和頸外動脈,不插線阻斷血流,治療組于復制缺血腦梗死模型后1小時皮下注射rhG-CSF10 μ g/k g/d,連用5天;對照組于術后皮下注射等量的生理鹽水。3組大鼠分別在MCAO術后48小時,分別取10只心臟灌注取腦,免疫組化檢測CD34.陽性細胞;術后2周各取10只斷顱取腦,TTC染色后檢測腦梗死的體積,各取10只分別于術前,術后1周,術后3周檢測體重及體感誘發(fā)電位;分別取2只于術后1個月進行電鏡觀察。
3、 結果: 1復制大鼠腦梗死模型后,大鼠活動明顯減少,并出現(xiàn)不同程度運動障礙,體重減輕,假手術組無以上改變,術后1周治療組體重減輕率(15.44±8.97)﹪,對照組則為(14.44±6.32)﹪,兩者無顯著性差異(P>0.05)。2術后2周各組大鼠腦組織TTC染色結果:1)在假手術組腦組織都被染成紅色;2)治療組和對照組腦梗死體積恒定于右側大腦中動脈(MCA)供血區(qū),包括大腦皮層及基底節(jié)大鼠腦組織區(qū),假手術組無梗死區(qū);TTC染色
4、檢查對照組在右半腦出現(xiàn)邊界清晰的,范圍恒定的蒼白梗死灶,圖像分析結果顯示:治療組梗死灶體積為(24.84±6.28)﹪,對照組則為(35.85±5.79)﹪,兩者的差異顯著(P<0.01)。3治療組和對照組大鼠體感誘發(fā)電位各項指標與術前有很大差別;同時治療組在兩個時相點(1周和3周)也有明顯的好轉,統(tǒng)計學分析:P1和NI潛伏期測定結果MCAO術前,各組大鼠P1和NI潛伏期差異均無明顯性意義(P>0.05);假手術組大鼠,于手術后各時相點
5、P1和NI潛伏期均無明顯改變(P>0.05);治療組和對照組大鼠,于MCAO術后,P1和NI潛伏期明顯延長(P<0.01),但動員治療組大鼠,在治療后其P1和NI潛伏期逐漸恢復,第3周始Pl和NI潛伏期明顯縮短,與治療前相比差異有非常顯著性意義(p<0.01);治療組第3周始,P1和NI潛伏期與MCAO術前相比差異無顯著性意義(p>0.05),與對照組大鼠相比差異有顯著性意義(P<0.05)。4 rhG-CSF治療組一個月后的梗死區(qū)神經(jīng)
6、元胞漿中出現(xiàn)了豐富的游離核糖體,出現(xiàn)單個核細胞,并可見巨噬細胞增多,而對照組大鼠腦梗死區(qū)神經(jīng)胞核固縮,變性并有嗜神經(jīng)現(xiàn)象。5術后48h,,rhG-CSF治療組大鼠的手術側腦組織中檢測到CD34陽性的單個核細胞,對側腦組織及對照組,假手術組大鼠的腦組織無此類細胞。 結論: rhG-CSF可減輕大鼠缺血性腦梗死程度,減少腦梗死體積,其機理可能是rhG-CSF對缺血神經(jīng)元具有保護作用,并動員自體骨髓干細胞,促進腦組織的再生與修復,故可
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