黑龍江哈爾濱地區(qū)部分鳥類、哺乳動(dòng)物三種腸道原蟲分子流行病學(xué)研究.pdf

1、隱孢子蟲（Cryptosporidium spp.）、芽囊原蟲（Blastocystis spp.）和畢氏腸微孢子蟲（Enterocytozoon bieneusi）是能感染人、多種鳥類和哺乳類動(dòng)物的重要人獸共患腸道寄生蟲。這三種腸道寄生蟲感染呈世界性分布，均能引起宿主不同程度的腹瀉，能使免疫抑制宿主發(fā)生嚴(yán)重腹瀉甚至死亡。因此這三種腸道原蟲對公共衛(wèi)生、畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展造成了嚴(yán)重的威脅。目前在中國東北地區(qū)關(guān)于這三種腸道原蟲的流行病學(xué)研究主要

2、針對人群和家畜，而忽視了與人類休閑生活密切相關(guān)的寵物市場和動(dòng)物園。這些地方動(dòng)物數(shù)量大、種類多、人員流動(dòng)量大且人類與動(dòng)物直接接觸機(jī)會(huì)多，大大增加了人獸共患寄生蟲病傳播的機(jī)率。
　　本研究以哈爾濱地區(qū)寵物市場和動(dòng)物園中鳥類和哺乳類動(dòng)物為調(diào)查對象，對這三種腸道原蟲的流行情況、蟲種和基因型分布進(jìn)行研究。本研究采用巢氏PCR針對隱孢子蟲和芽囊原蟲小亞基核糖體RNA(ribosomalsmall subunit，SSU rRNA)基因內(nèi)部多態(tài)

3、區(qū)、畢氏腸微孢子核糖體內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ribosomal internal transcribed spacer，ITS)進(jìn)行擴(kuò)增，并進(jìn)行測序分析。在74個(gè)品種，共357份鳥類和哺乳類動(dòng)物糞便樣本中共鑒定出24個(gè)隱孢子蟲陽性，陽性率為6.7％(24/357)，共鑒定出8個(gè)蟲種或基因型，分別為貝氏隱孢子蟲（C.baileyi，10/24）、火雞隱孢子蟲（C.meleagridis，3/24）、泛在隱孢子蟲（C.ubiquitum，2/24

4、）、鼠隱孢子蟲（C.muris，2/24）、雞隱孢子蟲（C.galli，1/24）、隱孢子蟲鳥基因型Ⅴ(Cryptosporidium aviangenotypeⅤ，2/24)、隱孢子蟲雪貂基因型（Cryptosporidium ferret genotype，3/24）和隱孢子蟲鼠基因型Ⅰ（Cryptosporidium rat genotypeⅠ，1/24）。發(fā)現(xiàn)三個(gè)具有人獸共患潛力的蟲種:火雞隱孢子蟲、泛在隱孢子蟲和鼠隱孢子蟲。這

5、三個(gè)隱孢子蟲蟲種已在多個(gè)國家和地區(qū)的人、鳥類、哺乳類動(dòng)物和水樣中均有報(bào)道，具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。本研究在357個(gè)糞便樣本中共鑒定出28個(gè)芽囊原蟲陽性，陽性率為7.8％(28/357)。28個(gè)芽囊原蟲陽性中22個(gè)陽性鑒定為亞型ST1、ST2和ST17?；赟SU rRNA基因序列對亞確定亞型的分離株進(jìn)行亞型分型，顯示其與亞型ST5和ST7親緣關(guān)系最近，亞型ST1、ST2、ST5和ST7均有人獸共患潛力。在357份樣本中僅在一份獼猴糞便

6、樣本中鑒定出畢氏腸微孢子蟲陽性，陽性率為0.3％(1/357)，為已知基因型D。據(jù)先前依據(jù)ITS位點(diǎn)的進(jìn)化分析表明，基因型D分布在具有人獸共患潛力的進(jìn)化組Group1中。
　　對本研究還對鑒定出的8個(gè)隱孢子蟲蟲種和基因型以及畢氏腸微孢子蟲基因型D在世界范圍內(nèi)的宿主范圍進(jìn)行了總結(jié)歸納。確定本研究首次在金絲雀、虎皮鸚鵡、烏骨雞和畫眉鳥糞便中鑒定出C.baileyi;首次在費(fèi)氏情侶鸚鵡和牡丹鸚鵡糞便中鑒定出Cryptosporidium

7、 aviangenotypeⅤ;首次在鷯哥和刺猬糞樣中鑒定出C.ubiquitum，首次在虎皮鸚鵡糞便中鑒定出Cryptosporidium ferret genotype;首次在藍(lán)喉金剛鸚鵡糞便中鑒定出C.muris及首次在火雞糞便中鑒定出Cryptosporidium rat genotypeⅠ，結(jié)果擴(kuò)大了隱孢子蟲的宿主范圍。另外，本研究在八哥、鷯哥、原鴿、虎皮鸚鵡、刺猬和毛絲鼠中首次鑒定出芽囊原蟲亞型ST17。
　　本研究鑒

8、定出具有人獸共患潛力的隱孢子蟲蟲種:火雞隱孢子蟲、鼠隱孢子蟲和泛在隱孢子蟲;芽囊原蟲亞型ST1和ST2;畢氏腸微孢子蟲基因型D。本研究鑒定出的具有人獸共患潛力的蟲種、基因型和亞型都具有廣泛的宿主范圍，在世界范圍內(nèi)的多個(gè)國家和地區(qū)的人、水、鳥類和哺乳類動(dòng)物中均有報(bào)道，說明寵物市場和動(dòng)物園中的動(dòng)物可能是人、鳥類和哺乳類動(dòng)物隱孢子蟲病、芽囊原蟲病和畢氏腸微孢子蟲病的貯存宿主或潛在感染來源。本項(xiàng)研究涉及的寵物市場和動(dòng)物園中的動(dòng)物種類較多且人與動(dòng)