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文檔簡介
1、我們實驗室通過體外發(fā)酵實驗發(fā)現(xiàn),將分離自奶牛瘤胃液的兼性厭氧纖維素分解菌(L5)和固氮菌(C1)按照4∶1的比例添加,促進了瘤胃發(fā)酵、并提高了纖維素的降解率。我們的假設是:飼喂L5和C1可能具有促進奶牛瘤胃發(fā)酵的作用,而這種作用將會在奶牛的營養(yǎng)物質(zhì)消化和泌乳性能上得以體現(xiàn)。因此,本文旨在通過奶牛飼喂試驗來驗證我們的假設,并進一步認識奶牛瘤胃L5和C1。
菌種活化和現(xiàn)場試驗所需菌量的確定
(1)首先于-20℃冰箱內(nèi)取出
2、兼性厭氧的纖維素分解菌L5和固氮菌C1,在室溫條件下解凍后,再進行菌株的活化處理。兩種菌株的活化為采用液體LB培養(yǎng)基對菌株進行二次復活處理。待培養(yǎng)液內(nèi)的活菌濃度約達到109 CFU·mL-1及以上程度,再通過稀釋涂布平板法測定培養(yǎng)液里實際活菌的數(shù)量。
(2)奶牛瘤胃內(nèi)容物容積按56.9 L,瘤胃內(nèi)容物外流速度每小時按總體積的6%,計算出每頭奶牛每1次飼喂所需的活菌總數(shù)為3.368×1011 CFU。兩種菌劑L5和C1是按照4∶
3、1的比例進行混合的,所以其中含L5為2.694×1011 CFU、C1為0.674×1011 CFU。因為最后菌液要與30%的甘油按照1∶1的比例保存在1.5 mL EP管內(nèi)。所以在保證每頭奶牛每1次飼喂L5為2.694×1011 CFU和C1為0.674×1011 CFU的基礎上,要用滅活的LB液體培養(yǎng)基將L5培養(yǎng)液的濃度調(diào)整為5.388×1011 CFU·mL-1和C1培養(yǎng)液的濃度調(diào)整為1.348×1011CFU·mL-1。即每種菌
4、液吸取0.5 mL與0.5 mL30%的甘油混合混勻后,置于冰箱-20℃條件下保存?zhèn)溆谩?br> 現(xiàn)場飼喂試驗
本試驗采用單因素試驗設計,將18頭體重(550±50 kg)相近、泌乳天數(shù)(160±20 d)相近和泌乳量(31.72±3.01 kg·d-1)也相近的荷斯坦奶牛隨機分為對照組和試驗組兩個組別。對照組奶牛飼喂奶牛場日常飼糧加上滅活的L5+C1(L5∶C1=4∶1)混合菌劑,試驗組飼喂日常飼糧加上L5+C1混合菌劑。
5、試驗包括16天的預飼期和4天的采樣期,預飼期間觀察并熟悉奶牛采食情況、趴臥和排糞等個體行為;采樣期進行料樣、糞樣、奶樣和血樣樣品的采集。結(jié)果表明:雖然該混合菌劑對日糧NDF、ADF和Ash的表觀消化率沒有顯著影響(P>0.5),但它卻可以顯著的提高日糧EE的表觀消化率(P=0.01);另外混合菌劑有提高日糧CP利用效率的趨勢(P=0.06)。此外,混合菌株對牛奶中乳糖、乳脂、乳蛋白、總固形物和體細胞數(shù)等乳常規(guī)指標以及血清尿素氮、血糖、膽
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