健康育齡婦女陰道內乳酸桿菌菌群的分離與鑒定.pdf

1、乳酸桿菌(Lactobacillus spp.)是育齡婦女正常陰道微生態(tài)菌群的主要組成部分，通過產生乳酸、過氧化氫、細菌素及其它的抗微生物物質來抑制陰道中的致病微生物，從而維護陰道的正常生理環(huán)境。臨床研究表明，產生過氧化氫的乳酸桿菌的存在可以降低細菌性陰道病、淋病和HIV的發(fā)病率。本研究對223例健康育齡婦女陰道內的乳酸桿菌進行收集、分離、培養(yǎng)，并利用16SrRNA基因分析法鑒定細菌種屬，從而了解我國育齡婦女正常陰道內乳酸桿菌的主要種類

2、，分析其產生過氧化氫的能力，并研究乳酸桿菌隨時間的定植變化，為利用乳酸桿菌進行微生態(tài)治療提供依據。
　　 第—部分：健康育齡婦女陰道內乳酸桿菌菌群的分離與鑒定
　　 目的：調查健康育齡婦女陰道內乳酸桿菌的主要菌群種類及其產生過氧化氫的能力。方法：采集223例健康育齡婦女陰道側壁的分泌物，經過乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基(Rogosa)分離培養(yǎng)后，提取細菌染色體DNA，PCR擴增細菌的16S rRNA基因，測定16S rRNA核苷

3、酸序列，然后與基因庫(GenBank)中的數(shù)據進行比對，確定細菌的種類。并對乳酸桿菌產生過氧化氫的能力進行分析。結果：從223例健康育齡婦女陰道中分離到8種乳酸桿菌，較常見的種屬為卷曲乳桿菌L.crispatus(53.7％)，詹氏乳桿菌L.jensenii(27.9％)與格氏乳桿菌L.gasseri(10.3％)。其它少見的細菌類型包括陰道乳桿菌L.vaginalis(2.2％)，L.coleohominis(1.5％)，約氏乳桿菌L

4、.johnsonii(1.5％)，嗜酸乳桿菌L.acidophilus(1.5％)及發(fā)酵乳桿菌L.fermentum(1.5％)。大多數(shù)乳酸桿菌均能產生過氧化氫，L.crispatus、L.jensenii和L.acidophilus產生過氧化氫的能力較強。結論：L.crispatus、L.jensenii與L.gasseri是健康育齡婦女陰道內乳酸桿菌的主要種屬。L.crispatus、L.jensenii和L.acidophilus

5、有較強的產生過氧化氫的能力。
　　 第二部分：陰道內乳酸桿菌隨時間變化的初步研究
　　 目的：探討陰道內乳酸桿菌是否隨時間發(fā)生變化，即乳酸桿菌的穩(wěn)定性，探討益生菌的適宜種類。方法：對16例分離到乳酸桿菌的婦女進行長約3個月的隨訪，于月經間期采集陰道側壁的分泌物，分離、培養(yǎng)及鑒定方法同上。結果：10例受試者的優(yōu)勢菌種在隨訪期內均與初始種類相同，6例受試者陰道內的優(yōu)勢乳酸桿菌在隨訪期間丟失或轉變?yōu)槠渌N類，乳酸桿菌是否發(fā)生變