甲基汞暴露對(duì)幼兒神經(jīng)發(fā)育影響的流行病學(xué)及基礎(chǔ)研究.pdf

1、1. 孕期低水平汞暴露對(duì)幼兒神經(jīng)發(fā)育影響的前瞻性研究 目的：探討孕期低水平汞暴露對(duì)幼兒神經(jīng)發(fā)育的影響。 方法：選取舟山市婦幼保健院出生的408名新生兒測(cè)定臍帶血汞水平，在兒童兩歲時(shí)隨訪，再次對(duì)其進(jìn)行發(fā)育評(píng)估。 結(jié)果：⑴兩歲發(fā)汞平均水平6.21±0.04 μg/kg(lnⅩ轉(zhuǎn)換后)；兩歲動(dòng)作能116.36±0.83 應(yīng)物能101.79±0.70言語(yǔ)能108.11±0.87應(yīng)人能122.03±0.92。⑵兩歲發(fā)汞值

2、與臍帶血汞值具有顯著相關(guān)（r=0.114）。⑶以單因素方差分析分別對(duì)低汞組、中間組、高汞組及本次劃分的相對(duì)低汞組、中間組、相對(duì)高汞組四項(xiàng)神經(jīng)發(fā)育水平進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果組間各值均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均﹥0.05）。⑷多元逐步回歸分析發(fā)現(xiàn)影響兩歲幼兒發(fā)汞值的因素按照影響程度大小依次為父親吸煙量，兒童偏食，獨(dú)走時(shí)間，兒童補(bǔ)維生素，臍血汞值，妊娠情緒，母親吃魚(yú)次數(shù)，妊娠補(bǔ)鈣。⑸影響動(dòng)作能值的因素按照影響程度大小依次為孕婦吃魚(yú)次數(shù)，有意識(shí)叫人時(shí)間。⑹應(yīng)物

3、能的影響因素依次為孕周，看圖有無(wú)講述。⑺應(yīng)人能的影響因素依次為語(yǔ)言狀況，進(jìn)食行為，玩耍時(shí)間。⑻言語(yǔ)能的影響因素分別為語(yǔ)言狀況，看圖時(shí)間，孕周，孕婦吃魚(yú)次數(shù)，兒童吃海鮮種類(lèi)，看圖講述，有意識(shí)叫人時(shí)間。 結(jié)論：⑴幼兒發(fā)汞與臍帶血汞水平顯著相關(guān)。⑵孕期低水平汞暴露對(duì)幼兒期神經(jīng)發(fā)育未觀察到不良影響。 2. 甲基汞暴露模型的建立及汞暴露對(duì)幼鼠海馬超微結(jié)構(gòu)的影響 目的：建立甲基汞暴露模型，探討孕期哺乳期不同的甲基汞暴露水

4、平在不同時(shí)間對(duì)仔鼠海馬超微結(jié)構(gòu)的損傷。 方法：從孕鼠第一天起至仔鼠出生后18天分別給予氯化甲基汞0mg/kg.d、 1mg/kg.d、 2mg/kg.d、4mg/kg.d飲水暴露，測(cè)21天孕鼠腦汞，并于21天、42天、60天仔鼠取樣測(cè)腦汞及做電鏡。 結(jié)果：⑴　21天孕鼠各組腦汞含量差異明顯（P<0.01）；21天、42天、60天仔鼠不同暴露水平的各組組間差異明顯（P均<0.01）；⑵　除Ⅰ組外Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組仔鼠腦汞水平隨

5、時(shí)間變化明顯，均略有下降（P<0.01）。⑶電鏡下觀察甲基汞暴露后海馬的神經(jīng)元減少，細(xì)胞腫脹，細(xì)胞膜破裂甚至壞死并且組織損傷隨甲基汞暴露劑量的增加而加劇。⑷結(jié)果還表明海馬組織的損傷隨去除暴露時(shí)間的增加而減輕。 結(jié)論：⑴腦汞水平與暴露劑量成劑量－效應(yīng)關(guān)系。⑵暴露組腦汞隨暴露去除時(shí)間增加而顯著下降。⑶海馬組織損傷與甲基汞暴露劑量間成劑量－效應(yīng)關(guān)系。⑷組織損傷隨去除暴露時(shí)間的增加而減輕。 3. 甲基汞暴露對(duì)仔鼠海馬的mGluR

6、2,3,5mRNA及蛋白水平表達(dá)的影響 目的：孕期哺乳期不同劑量的甲基汞暴露對(duì)仔鼠海馬的mGluR2,3,5的mRNA及蛋白水平表達(dá)的影響。 方法：分別在仔鼠出生后21天42天60天取樣，每次每組取12只小鼠做熒光定量PCR檢測(cè)及Western blot蛋白質(zhì)印跡。 結(jié)果：⑴ mGluR5、mGluR2 、mGluR3在21天42天60天各暴露組mRNA表達(dá)均顯著低于相應(yīng)對(duì)照組，mGluR5（F值分別為5.7

7、66,78.001,21.218, P均﹤0.05）；mGluR2（F值分別為66.455,16.640,15.532, P均﹤0.05）；mGluR 3（F值分別為38.873,87.876,16.894, P均﹤0.05）。⑵ mGluR5、mGluR2+3蛋白表達(dá)均顯著低于相應(yīng)對(duì)照組，mGluR5 (F值分別為19.00，19.57，9.04，P均﹤0.05）；mGluR2+3（F值分別為7.91,36.92,21.36，P﹤0.

8、05）。⑶在較低劑量范圍時(shí)mGluR2、mGluR3 、mGluR5的mRNA及蛋白的表達(dá)隨甲基汞暴露劑量的增加而降低，而當(dāng)暴露劑量達(dá)到一定濃度時(shí)，表現(xiàn)為暴露劑量增加基因的表達(dá)不再下降。⑷mGluR2,3,5mRNA及蛋白水平表達(dá)會(huì)隨去除暴露時(shí)間的增加而增加。 結(jié)論：⑴甲基汞暴露會(huì)引起mGluR2,3,5mRNA及蛋白水平表達(dá)下降，但兩者間非劑量效應(yīng)關(guān)系。⑵隨去除暴露時(shí)間增加，mGluR2,3,5mRNA及蛋白水平表達(dá)有所增加