CO2氣腹環(huán)境對人宮頸癌Hela細(xì)胞生長及卡鉑敏感性的影響.pdf

1、目的：探討腹腔鏡二氧化碳（CO2）氣腹環(huán)境對人宮頸癌 Hela細(xì)胞生長的影響，及CO2氣腹環(huán)境作用后Hela細(xì)胞對卡鉑敏感性的影響。
　　方法：以人宮頸癌 Hela細(xì)胞株為研究對象，將人宮頸癌 Hela細(xì)胞置于含5％CO2、溫度為37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育，待細(xì)胞傳代2～3代后，取處于對數(shù)生長期 Hela細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為1.0×l06/m1，接種至細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24 h，使細(xì)胞貼壁生長。細(xì)胞分為4組：對照組

2、、CO2組、卡鉑組、CO2+卡鉑組。對照組放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，連續(xù)72 h；卡鉑組細(xì)胞培養(yǎng)24 h后換用含20 ug/ml卡鉑的培養(yǎng)液，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)靜置培養(yǎng)48 h；CO2組細(xì)胞置于醫(yī)用無菌引流袋內(nèi)封固，將醫(yī)用無菌引流管與氣腹機(jī)相連接，氣腹機(jī)壓力調(diào)至12 mmHg通入99.5%醫(yī)用CO2氣體，持續(xù)2 h，然后置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)連續(xù)培養(yǎng)72 h；CO2+卡鉑組在上述99.5%醫(yī)用CO2氣體處理后24 h換用含20 ug/m1卡鉑的

3、培養(yǎng)液，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)靜置培養(yǎng)48 h。利用 CCK8法檢測各組細(xì)胞的增殖活性；流式細(xì)胞儀PI染色分析各組細(xì)胞生長周期；及Annexin V-FITC檢測細(xì)胞早期凋亡率。
　　結(jié)果：應(yīng)用統(tǒng)計軟件 SPSS13.0對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，統(tǒng)計方法為析因設(shè)計方差分析和t檢驗，P＜0.05為差異有顯著性。結(jié)果表明：1 CO2+卡鉑組與對照組比較，模擬CO2氣腹環(huán)境后卡鉑對Hela細(xì)胞生長仍有明顯抑制作用。2 Hela細(xì)胞置于模擬CO2

4、氣腹環(huán)境后，與未經(jīng) CO2處理組細(xì)胞比較，CO2處理組Hela細(xì)胞增殖抑制率與早期凋亡率均明顯下降，但細(xì)胞周期無明顯差異。3加卡鉑各組與不加卡鉑各組細(xì)胞比較，卡鉑處理組 Hela細(xì)胞增殖抑制率上升明顯，并使腫瘤細(xì)胞停滯于 S期，G1、G2期細(xì)胞明顯減少，凋亡指數(shù)明顯增加。4 CO2+卡鉑組與卡鉑組比較，二者細(xì)胞增殖抑制率及早期細(xì)胞凋亡率均未見明顯差異，前者 G0/G1期細(xì)胞減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：1 CO2氣腹環(huán)境能促