人中性粒細(xì)胞多肽介導(dǎo)肺損傷的體外研究膿毒血癥預(yù)后敏感因素分析及預(yù)后敏感因素的早期評估.pdf

1、背景:
　　急性呼吸窘迫綜合征（Acute respiratory distress syndrome, ARDS）是由心源性以外的各種肺內(nèi)、外致病因素導(dǎo)致的急性、進(jìn)行性呼吸衰竭，由于缺乏特異有效的治療方法，其病死率仍然高達(dá)36％－44%。保護(hù)性機(jī)械輔助通氣是ARDS目前的主要支持治療手段，也是目前唯一能降低ARDS死亡率的治療手段，有效的藥物治療手段仍然缺乏，而即使是保護(hù)性機(jī)械通氣也無法避免機(jī)械通氣相關(guān)性肺損傷的發(fā)生， ARDS

2、的死亡率仍居高不下。肺泡上皮及微血管內(nèi)皮通透構(gòu)成呼吸膜結(jié)構(gòu)，任何因素導(dǎo)致的肺泡上皮及肺微血管內(nèi)皮的損傷都將導(dǎo)致肺泡結(jié)構(gòu)的破壞，造成肺氣體交換功能障礙。ARDS的發(fā)病機(jī)制研究對探索有效的藥物治療手段降低ARDS死亡率至關(guān)重要。肺泡上皮和肺微血管內(nèi)皮通透性增高及肺泡內(nèi)大量中性粒浸潤是ARDS急性期的特征性病理表現(xiàn)。活化的中性粒細(xì)胞在肺泡浸潤并釋放大量炎癥介質(zhì)和蛋白酶類進(jìn)一步加重肺損傷，并趨化巨噬細(xì)胞細(xì)胞及其他炎癥細(xì)胞的浸潤，造成持續(xù)的肺泡損

3、傷。人中性粒細(xì)胞多肽(HNPs)是中性粒含量最多的蛋白，占中性粒細(xì)胞總蛋白5%以上，初級顆粒蛋白含量的50%以上。研究表明高濃度的HNPs對肺部損傷的誘導(dǎo)及進(jìn)展具有重要作用。嘌呤受體P2Y家族是一類促代謝型受體，由細(xì)胞外核苷酸激活并通過G-蛋白偶聯(lián)受體生成細(xì)胞內(nèi)第二信使。P2Y6是P2Y家族成員之一， 可介導(dǎo)HNPs誘導(dǎo)IL-8生成，在炎癥誘導(dǎo)及免疫調(diào)節(jié)中具有重要作用。本研究以HNPs刺激原代小氣道上皮細(xì)胞(SAECs)及肺微

4、血管內(nèi)皮細(xì)胞(HPMVECs)，探討HNPs介導(dǎo)SAECs及HPMVECs損傷的相關(guān)機(jī)制及P2Y6在其中的作用。
　　目的:
　　研究HNPs對人肺小氣道上皮細(xì)胞及肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性的影響。
　　方法:
　　體外培養(yǎng)人原代小氣道上皮細(xì)胞及肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞，以不同濃度的HNPs對細(xì)胞進(jìn)行刺激，研究細(xì)胞通透性改變。
　　結(jié)果:
　　1.20μg/ml及50μg/ml HNPs8h刺激可誘導(dǎo)HPMVEC

5、s通透性升高，50μg/ml8h刺激可誘導(dǎo)SAECs通透性升高
　　2.HNPs誘導(dǎo)的HPMVECs及SAECs通透性增加由P2Y6介導(dǎo)，可被MRS2578部分阻斷。
　　3.HPMVECs對HNPs敏感性高于SAECs，可能與P2Y6在HPMVCs表達(dá)明顯高于SAECs所致。
　　結(jié)論:
　　HNPs可通過P2Y6介導(dǎo)SAECs及HPMVECs通透性增加。
　　背景:
　　膿毒血癥是感染造成的全身性

6、損傷性炎癥反應(yīng)，膿毒血癥病因復(fù)雜，以肺部感染最為常見，其中又以革蘭陰性菌為主，由于病原菌陽性診斷率低造成膿毒血癥早期診斷及治療困難。另一方面，膿毒癥患者病情異質(zhì)性大，老年患者居多，病人常有不同的基礎(chǔ)疾病，進(jìn)一步加重膿毒癥治療困難。膿毒血癥依病情輕重可分為膿毒血癥，重癥膿毒血癥及膿毒癥休克。目前，膿毒癥發(fā)病率仍以每年5~10%的速度上升，隨病情進(jìn)展患者的死亡率明顯升高，膿毒癥患者整體死亡率為30~50%，是目前ICU面臨的難題。感染誘導(dǎo)全

7、身性炎癥反應(yīng)并造成一系列不同程度的組織器官損傷，如器官功能障礙，凝血與抗凝失衡，全身組織灌注不足與缺血缺氧等，患者最終往往不是死于感染，而是死于感染誘導(dǎo)的全身性損傷性炎癥。感染及其控制程度，全身性炎癥及其導(dǎo)致的組織器官功能障礙，基礎(chǔ)疾病，并發(fā)疾病，疾病進(jìn)展等都不同程度影響患者預(yù)后。衡量患者基礎(chǔ)病情，針對疾病的本質(zhì)監(jiān)測病情進(jìn)展，篩選膿毒血癥預(yù)后早期敏感因素，并及時有效糾正預(yù)后影響對膿毒血癥患者具重要意義。
　　目的:
　　對重

8、癥膿毒血癥患者的預(yù)后進(jìn)行多因素分析，并分析相對最敏感因素的早期預(yù)測指標(biāo)，為膿毒血癥早期干預(yù)提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　收集廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科2012-10-17至2013-8-8膿毒血癥患者臨床資料，納入膿毒血癥患者53例，根據(jù)患者ICU住院期間是否存在凝血功能障礙將病人分為A,B兩組，根據(jù)膿毒血癥嚴(yán)重程度將病人分為膿毒血癥，重癥膿毒血癥，膿毒血癥休克，根據(jù)APACHEII評分將病人分為低危(APACHE

9、II＜10)，中危(APACHEII≥10)，高危(APACHEII≥20)。入組后記錄患者年齡，性別，等基本臨床資料，并進(jìn)行APACHEII評分及。24h內(nèi)采取血液標(biāo)本，血漿IL-6，IL-8；血乳酸，血清降鈣素原(PCT) 為臨床檢查項目。根據(jù)臨床檢查及表現(xiàn)分析ICU住院期間是否存在凝血功能障礙及凝血功能障礙是否得到糾正與重癥膿毒血癥患者的28天預(yù)后及各影響因素的敏感性分析，并分析患者預(yù)后相對最敏感因素的早期評估。

10、　　結(jié)果:
　　年齡、性別是重癥膿毒血癥患者28天預(yù)后的混雜因素；膿毒血癥分級，APACHEII評分，ICU住院期間是否存在凝血功能障礙及凝血功能障礙是否得到糾正，患者ICU住院首次血乳酸，血清PCT，血漿IL-6，IL-8與患者預(yù)后明顯相關(guān)；是否存在凝血功能障礙及凝血功能障礙是否得到糾正，血乳酸水平是膿毒血癥患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素；是否存在凝血功能障礙及凝血功能障礙是否得到糾正是重癥膿毒血癥患者的最敏感預(yù)后影響因素；血漿IL-6

11、，IL-8濃度是膿毒血癥患者是否出現(xiàn)凝血功能障礙的早期預(yù)測因子。
　　結(jié)論:
　　膿毒血癥患者病情異質(zhì)性大，預(yù)后影響因素復(fù)雜，血乳酸、是否出現(xiàn)凝血功能障礙及凝血功能障礙是否糾正是膿毒血癥患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素。IL-6，IL-8水平與是否出現(xiàn)凝血功能障礙密切相關(guān)，可能成為凝血功能早期檢測指標(biāo)。本研究以膿毒血癥患者ICU住院期間是否出現(xiàn)凝血功能障礙及28天預(yù)后研究觀察目標(biāo)，以患者入組第一天各項指標(biāo)為監(jiān)測指標(biāo)，未對各項指標(biāo)進(jìn)行動