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文檔簡介
1、目的:進(jìn)一步分離純化胎盤免疫調(diào)節(jié)因子(placental immunoregulator factor,PF)并測定其活性;研究胎盤免疫調(diào)節(jié)因子對大鼠子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EMS)的治療效果。 方法:利用健康產(chǎn)婦的胎盤提取胎盤免疫調(diào)節(jié)因子,將提取到的胎盤免疫調(diào)節(jié)因子用SepttadexG-25層析柱進(jìn)行初步分離純化,E玫瑰花環(huán)活性檢測方法對得到的各個(gè)組分進(jìn)行活性檢測;將胎盤免疫調(diào)節(jié)因子及各組分作用于卵巢癌細(xì)
2、胞A2780,MTT法繪制生長曲線。 建立雌性大鼠子宮內(nèi)膜異位癥的動物模型,將其隨機(jī)分為對照組,模型組和胎盤免疫調(diào)節(jié)因子低、中、高治療組。胎盤免疫調(diào)節(jié)因子治療8周后,開腹測量異位內(nèi)膜生長體積;用ELLSA法測量血清中細(xì)胞因子IL-2含量;取外周血做血涂片,用α醋酸萘酸酯酶組化染色方法檢測用藥后外周血Q醋酸萘酸酯酶陽性細(xì)胞;用ATP生物熒光法測定脾細(xì)胞增殖;用中性紅法測定腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能;用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PC
3、R)技術(shù)檢測大鼠脾臟組織IL-6mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果:從胎盤免疫調(diào)節(jié)因子中分離純化出4個(gè)組分,E玫瑰花環(huán)活性檢測各組分,得到一個(gè)活性峰:峰4;在卵巢癌細(xì)胞A2780中加入胎盤免疫調(diào)節(jié)因子和峰4后,卵巢癌細(xì)胞A2780的生長均受到抑制。 經(jīng)胎盤免疫調(diào)節(jié)因子治療后,各治療組治療后異位內(nèi)膜體積較治療前明顯減小;各治療組治療后較對照組、模型組血清IL-2含量升高,α醋酸萘酸酯酶活性增強(qiáng),腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能增高;中、高劑量
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