Midkine、Skp2在大腸癌組織中的表達及其臨床意義.pdf

1、大腸癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率有逐年上升的趨勢。盡管近年來以手術為主的綜合治療使大腸癌患者的預后有很大改善，但術后5年生存率仍徘徊在50-60％左右。因此，深入研究控制大腸癌發(fā)生、發(fā)展過程的關鍵基因表達變化及其作用將為大腸癌早期診斷、預后判斷和抗轉移治療提供理論依據(jù)。 目的：本研究旨在通過檢測中期因子(Midkine，MK)mRNA、S期激酶相關蛋白2(S-phasekinase-associacedprotein2

2、，Skp2)mRNA和Midkine蛋白、Skp2蛋白、MVD、p27kip1蛋白在大腸不同病變組織的表達情況，探討Midkine、Skp2在大腸癌中表達的臨床意義及其與MVD、p27kip1的關系，明確它們在大腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，為臨床診斷、治療提供理論依據(jù)。 材料與方法：(1)組織標本取自南方醫(yī)科大學珠江醫(yī)院2000.1-2004.10外科手術切除及結腸鏡下活檢標本。共選取83例大腸癌、18例大腸腺瘤和20例正常大腸黏膜

3、標本。全部標本經(jīng)4％多聚甲醛(含0.1％DEPC)固定液固定、常規(guī)脫水后石蠟包埋。(2)應用原位雜交方法檢測MidkinemRNA、Skp2mRNA在大腸癌、大腸腺瘤和正常大腸黏膜組織中的表達。(3)應用免疫組化SP(streptavidin-peroxidase)法檢測Midkine蛋白、Skp2蛋白、MVD、p27kip1蛋白在大腸癌、大腸腺瘤和正常大腸黏膜組織中的表達，以CD34作為血管內(nèi)皮細胞標記物測定MVD。 應用SP

4、SS10.0軟件包進行統(tǒng)計學分析，采用兩獨立樣本t檢驗、單因素方差分析和pearson相關分析。以雙側P≤0.05為有顯著性差異。 結果：(1)MidkinemRNA在大腸癌組織、大腸腺瘤組織、正常大腸黏膜組織中表達的細胞陽性率分別為：(72.58±17.40)％，(37.06±12.08)％，0％，三組間MidkinemRNA表達相互比較，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。Midkine蛋白在大腸癌組織、大腸腺瘤組織、正常

5、大腸黏膜組織中表達的細胞陽性率分別為：(69.42±19.83)％，(30.67±12.89)％，0％。三組間Midkine蛋白的表達相互比較，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。MidkinemRNA與Midkine蛋白在大腸癌組織中表達具有一致性，兩者密切相關(r=0.957，P＜0.01)。MidkinemRNA和蛋白表達在大腸癌中隨組織分化程度降低和Dukes分期的變晚而增加，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；Midkinem

6、RNA和蛋白表達在大腸癌侵及漿膜組高于未侵及漿膜組(P＜0.01)，在大腸癌有淋巴結轉移組高于無淋巴結轉移組(P＜0.01)，在大腸癌有器官轉移組也高于無器官轉移組(P＜0.05)。MidkinemRNA和蛋白在大腸癌中的表達與患者性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小均無相關性(P＞0.05)。 (2)Skp2mRNA在大腸癌組織、大腸腺瘤組織、正常大腸黏膜組織中表達的細胞陽性率分別為：(31.08±13.09)％，(19.83±11

7、.91)％，(9.15±7.29)％，三組間Skp2mRNA表達相互比較，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。Skp2蛋白在大腸癌組織、大腸腺瘤組織、正常大腸黏膜組織中表達的細胞陽性率分別為：(28.93±12.58)％，(17.28±10.66)％，(6.75±5.50)％。三組間Skp2蛋白的表達相互比較，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。Skp2mRNA與Skp2蛋白在大腸癌組織中表達具有一致性，兩者密切相關(r=0.969

8、，P＜0.01)。Skp2mRNA和蛋白在大腸癌低分化組的表達高于高分化組(P＜0.05)，在大腸癌淋巴結有轉移組高于淋巴結無轉移組(P＜0.01)，在大腸癌Dukes分期C+D期組高于Dukes分期A+B期組(P＜0.01)。Skp2mRNA和蛋白均與患者性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、浸潤深度、有無器官轉移無相關性(P＞0.05)。 (3)大腸癌組織、腺瘤組織、正常大腸黏膜組織的MVD值分別為32.59±12.07，15.4

9、4±5.99，9.00±3.85，大腸癌組織MVD顯著高于腺瘤組織(P＜0.01)和正常大腸黏膜組織(P＜0.01)。大腸腺瘤組織MVD雖高于正常大腸黏膜組，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。MVD在大腸癌中隨組織分化程度降低和Dukes分期的變晚而增加，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；且在大腸癌直徑超過5cm組高于直徑未超過5cm組(P＜0.05)，在浸潤超過深肌層組高于未超過深肌層組(P＜0.01)，在有淋巴結轉移組高于無淋巴

10、結轉移組(P＜0.01)，在有器官轉移組高于無器官轉移組(P＜0.05)。MVD與患者性別、年齡、腫瘤部位無明顯相關性(P＞0.05)。 (4)大腸癌組織、腺瘤組織和正常大腸黏膜組織p27kip1蛋白表達的細胞陽性率分別為：(24.61±11.27)％，(46.94±13.22)％，(65.40±15.74)％，三組間相互比較，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。p27kip1蛋白在大腸癌低分化組低于高分化組(P＜0.01)，

11、在有淋巴結轉移組低于無淋巴結轉移組(P＜0.01)、Dukes分期C+D期組低于A+B期組(P＜0.05)。p27kip1蛋白在大腸癌的表達與患者性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、浸潤深度、有無器官轉移無明顯相關性(P＞0.05)。 (5)連續(xù)切片的83例大腸癌中Midkine蛋白的表達與MVD表達pearson相關分析顯示相關系數(shù)為0.670，兩者呈正相關(P＜0.01)；83例大腸癌中Skp2蛋白表達與p27kip1蛋白表達p

12、earson相關分析顯示相關系數(shù)為-0.389，兩者呈負相關(P＜0.01)。 結論：一、(1)MidkinemRNA和Midkine蛋白在大腸癌組織中具有較高表達水平，且二者在大腸腫瘤的形成過程中表達一致，表明Midkine的表達在轉錄水平受到調(diào)控，Midkine基因轉錄的異常啟動可能是Midkine重新表達的關鍵因素。Midkine高表達可能是大腸癌發(fā)生過程中的一個早期分子事件，(2)MidkinemRNA和蛋白的表達與大腸

13、癌的分化、浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移、Dukes分期、及微血管密度具有相關性。Midkine高表達可能參與大腸癌細胞局部浸潤、轉移，并在腫瘤血管生成中發(fā)揮重要作用。(3)聯(lián)合檢測大腸癌組織中的Midkine及MVD變化，可作為大腸癌的一個輔助診斷指標，用于評價腫瘤的生物學行為和指導臨床治療。 二、(1)Skp2mRNA和Skp2蛋白在大腸癌組織中的表達水平上調(diào)，在大腸腫瘤的形成過程中兩者表達一致，同樣，Skp2的表達也可能在