紫杉醇自組裝核殼型納米膠束的制備與性能.pdf

1、紫杉醇(paclitaxel，商品名Taxol)，是從紅豆杉屬植物中提取出來(lái)的一種具有高效抗腫瘤活性的天然物質(zhì)。它是一種新型的微管穩(wěn)定劑，具有獨(dú)特抗癌活性。自1992年12月美國(guó)FDA批準(zhǔn)紫杉醇用于治療晚期卵巢癌以來(lái)，其在臨床上的應(yīng)用范圍逐漸擴(kuò)展，并從二線藥物變成一線用藥，可以說(shuō)是目前最好的抗癌藥物之一。 紫杉醇是一種天然的三環(huán)二萜物質(zhì)，有一個(gè)龐大繁雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu)及眾多的疏水性取代基，因而在水中的溶解性很差。臨床應(yīng)用的主要是紫杉醇

2、注射液，即由乳浮EL(Cremophor EL，含聚氧乙烯蓖麻油)/無(wú)水乙醇(50：50)制成的無(wú)色黏稠狀濃溶液。這種傳統(tǒng)劑型設(shè)計(jì)的目的是為了改善紫杉醇的水溶性。但大量研究顯示聚氧乙烯蓖麻油在體內(nèi)可促使大量組織胺釋放，產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)，而且還可溶解聚氯乙烯(PVC)輸液器中的二乙烯己基鄰苯二甲酸鹽，帶來(lái)嚴(yán)重的毒性反應(yīng)，大大影響紫杉醇的臨床安全應(yīng)用。 基于上述原因，國(guó)內(nèi)外眾多科學(xué)家對(duì)紫杉醇的劑型改造進(jìn)行了大量研究。本研究設(shè)計(jì)了一種兩親

3、型嵌段共聚物，其親水段為聚乙二醇(PEG)，在人體內(nèi)不會(huì)產(chǎn)生毒、副作用，無(wú)免疫源性，而疏水段為可生物降解的聚L-谷氨酸γ-芐酯(PBLG)，其降解產(chǎn)物為內(nèi)源性物質(zhì)谷氨酸，在體內(nèi)不易產(chǎn)生蓄積和毒副作用，因此利用兩組分形成的嵌段共聚物(PEG-PBLG)具親水和疏水性為一體，在水溶液中可自組裝形成球形核一殼結(jié)構(gòu)的納米膠束系統(tǒng)，其中疏水嵌段構(gòu)成內(nèi)核并作為微藥庫(kù)通過(guò)化學(xué)鍵合或物理包埋的方式結(jié)合紫杉醇，極大地增加紫杉醇的水溶性，同時(shí)躲避體內(nèi)免疫系

4、統(tǒng)的層層監(jiān)視，延長(zhǎng)藥物在血液循環(huán)中的時(shí)間。圍繞上述研究目的，本文主要探討了以下幾方面的內(nèi)容。 (1)聚乙二醇-聚谷氨酸芐酯(PEG-PBLG)嵌段共聚物的合成以單甲氧端基聚乙二醇(MePEG)和L-谷氨酸為原料，合成了一系列組成的PEG-PBLG嵌段共聚物，利用IR、<'1>H-NMR對(duì)聚合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。結(jié)果表明，經(jīng)陰離子聚合可以生成PEG-PBLG嵌段共聚物，其中PBLG嵌段的優(yōu)勢(shì)構(gòu)象為α螺旋構(gòu)象。 (2)紫杉醇

5、/PEG-PBLG膠束的自組裝用超微透析法制備了紫杉醇/PEG-PBLG自組裝納米膠束系統(tǒng)，通過(guò)紫外和高效液相色譜(HPLC)驗(yàn)證了膠束對(duì)藥物的包埋作用，通過(guò)HPLC測(cè)定了膠束的載藥量和包封率。發(fā)現(xiàn)PEG-PBLG膠束的載藥量與載體的嵌段比有很大關(guān)系，疏水嵌段過(guò)大會(huì)引起膠束不穩(wěn)定，載藥量下降；載藥量隨投藥量的增加而增加，但包封降低。 (3)納米膠束的粒徑及分布通過(guò)動(dòng)態(tài)光散射(DLS)測(cè)定了納米膠束的粒徑及分布。結(jié)果表明，載體聚合

6、物的疏水嵌段比例愈高，膠束粒徑愈大；制備溶劑組成隨DMF所占比例的降低，膠束粒徑有先升后降的趨勢(shì)；聚合物濃度愈大，膠束粒徑愈大；膠束粒徑受紫杉醇投藥量的影響不顯著。 (4)紫杉醇/PEG-PBLG膠束的體外釋放采用紫外分光光度法測(cè)定釋藥介質(zhì)中紫杉醇的含量，觀察紫杉醇/PEG-PBLG膠束的體外釋放特性。發(fā)現(xiàn)紫杉醇/PEG-PBLG膠束具有緩釋作用，釋藥介質(zhì)的pH對(duì)藥物的釋放有很大影響，載藥量、膠束粒徑對(duì)釋藥也有一定的作用。

7、 (5)紫杉醇/PEG-PBLG膠束的細(xì)胞毒性試驗(yàn)體外培養(yǎng)HeLa細(xì)胞，通過(guò)MTT法，發(fā)現(xiàn)當(dāng)紫杉醇濃度高于20μg/ml時(shí)，紫杉醇/PEG-PBLG膠束的細(xì)胞毒性要低于紫杉醇油劑(JD<0.05)。 (6)紫杉醇/PEG-PBLG膠束的藥效試驗(yàn)建立了人肝癌HepG-2細(xì)胞裸鼠移植模型，觀察了紫杉醇膠束與紫杉醇注射油劑對(duì)荷瘤裸鼠的療效。發(fā)現(xiàn)紫杉醇膠束具有與紫杉醇注射油劑類似的抑制腫瘤作用。 綜上所述，以PEG-PBLG嵌