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文檔簡介
1、目的;易達拉奉(Edaravone)是日本三菱公司開發(fā)的一個新型治療腦梗塞的自由基清除劑,它是捕獲羥自由基(·OH)的活性抗氧劑。易達拉奉作為治療急性腦血管病的一個新藥,本試驗通過觀察此藥對大鼠腦缺血再灌注后梗塞面積,神經功能缺損程度,清除羥自由基能力及核因子κB、半胱天冬酶-3表達的影響,探討它的保護作用及作用機制。核因子κB(nuclearfactor-κBNF-κB)是一種重要的轉錄因子,參與許多基因的表達調控,是炎癥介質的中心環(huán)
2、節(jié)。而半胱天冬酶-3(Caspase-3)是凋亡執(zhí)行蛋白,在凋亡調控程序中居中心地位,它的啟動注定細胞必定死亡,被稱為凋亡蛋白。通過觀察易達拉奉對大鼠腦缺血再灌注后NF-κB和Caspase-3的變化,進一步了解自由基清除劑對Caspase-3及NF-κB的影響及其保護機制。 方法;Wistor雌、雄性大鼠共66只,隨機分為假手術組,鹽水對照組及易達拉奉用藥組,對照組及用藥組再進一步分為6h、24h、48h,根據(jù)Koizumi線
3、栓法建立大鼠左側大腦中動脈缺血再灌注模型(MCAO)。用神經功能缺損等級評分法觀察缺血再灌注后的行為功能的變化,TTC染色法檢測大腦梗塞積百分比,羥自由基試劑盒檢測羥自由基的含量,及用免疫組化方法檢測NF-κB和Caspase-3的蛋白表達的變化。 結果1、大鼠神經功能缺損評分結果鹽水對照組大鼠麻醉清醒后均出現(xiàn)右前肢無力,身體向右側旋轉或行走時向右側傾倒,或不能自行行走。神經功能缺損評分為假手術組均為0分。6h時,對照組為1.6
4、5±0.18分,用藥組1.24±0.18分,P<0.01;24h時,對照組為2.72±0.20分,用藥組1.74±0.20分,P<0.01;48h時,對照組為2.78±0.27分,用藥組1.49±0.17s分,P<0.01。 2、鼠腦大體形態(tài)及TTC染色結果缺血后,鹽水組缺血側鼠腦腫脹,有明確的梗塞灶,呈蒼白色,與MCAO支配的腦區(qū)域一致,未缺血部分呈粉紅色。而用藥組鼠腦腫脹明顯減輕,梗塞灶較鹽水組明顯減少。 3、羥自由
5、基檢測結果用羥自由基試劑盒分別檢測缺血2h再灌注48h鹽水組大鼠缺血側腦組織分別為勻漿0.418±0.017、胞漿0.283±0.022、和線粒體0.780±0.065,用藥組鼠腦缺血側羥自由基的含量分別為勻漿0.195±0.009*、胞漿0.216±0.024、及線粒體0.483±0.057。用藥組羥自由基含量較鹽水組明顯減少P<0.01。 4、鼠腦缺血再灌注后缺血區(qū)腦組織NF-κB蛋白的表達假手術組幾乎無NF-κB蛋白的表達
6、,鹽水組NF-κB蛋白表達6h開始升高,于24h達到高峰并于48h開始下降。6h時,用藥組NF-κB蛋白表達較鹽水組減少,但差異不明顯P>0.05;24h時,用藥組較鹽水組明顯減少P<0.01;48h時,用藥組NF-κB蛋白表達較鹽水組減少,仍有明顯差異P<0.05。 5、鼠腦缺血再灌注后缺血區(qū)腦組織Caspase-3蛋白的表達假手術組幾乎無Caspase-3蛋白的表達,鹽水組Caspase-3蛋白表達6h開始升高,于24h達到
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