D2-40,LYVE-1在乙肝相關(guān)性肝癌中的表達(dá)及其與淋巴道轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、研究背景和目的：一直以來腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移存在兩種觀點(diǎn)：一種觀點(diǎn)認(rèn)為是腫瘤細(xì)胞侵襲病灶周邊原有淋巴管系統(tǒng)并進(jìn)入淋巴液形成了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；另一種觀點(diǎn)認(rèn)為腫瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生一些淋巴因子從而誘導(dǎo)新生淋巴管的形成而實(shí)現(xiàn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。前者長(zhǎng)居主導(dǎo)地位，但近年來隨著淋巴管標(biāo)記物被逐漸發(fā)現(xiàn)，淋巴管生成在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用被受到重視。本實(shí)驗(yàn)通過觀察D2—40和淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體—1(LYVE—1)兩種淋巴管標(biāo)記物所標(biāo)記的微淋巴管密度(MLVD)在乙肝相關(guān)性肝癌

2、中的表達(dá)，來分析D2—40和LYVE—1的相關(guān)性及測(cè)定價(jià)值，探討微淋巴管密度與乙肝相關(guān)性肝癌的分化，淋巴轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑以及臨床病例參數(shù)之間的關(guān)系，并對(duì)微淋巴管密度(MLVD)與淋巴道轉(zhuǎn)移的關(guān)系進(jìn)行初步研究。
　　 方法：選取52例乙肝相關(guān)性肝細(xì)胞肝癌病理組織標(biāo)本，10例正常肝組織標(biāo)本，所收取標(biāo)本中：病理切片發(fā)現(xiàn)有淋巴轉(zhuǎn)移者19例，未發(fā)現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移者33例；癌組織呈低分化者22例，中高分化30例；乙肝相關(guān)性肝癌分期Ⅰ、Ⅱ期31例，Ⅲ

3、期21例；乙肝病毒載量即HBVDNA≥105U/L者23例，HBVDNA<105IU/L者29例；AFP(甲胎蛋白)≥400ng/ml者有34例，AFP<400ng/ml者18例等；對(duì)所有標(biāo)本分別進(jìn)行鼠抗人D2—40單克隆抗體及兔抗人LYVE—1多克隆抗體的檢測(cè)并對(duì)其標(biāo)記的微淋巴管進(jìn)行計(jì)數(shù)，最后應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS12．0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1．D2—40標(biāo)記的乙肝相關(guān)性肝細(xì)胞肝癌的微淋巴管密度(MLV

4、D)明顯高于正常肝組織的MLVD，P<0．01，差異顯著。肝細(xì)胞肝癌癌周組織MLVD明顯高于癌內(nèi)組織。MLVD在有淋巴轉(zhuǎn)移組、無淋巴轉(zhuǎn)移組分別為14．49±2．17、10．31±3．28，兩組間比較P<0．05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肝癌中—高分化組、及低分化組中MLVD分別為10．49±3．95，12．64±4．06，兩組間比較P<0．05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D2—40標(biāo)記的肝細(xì)胞肝癌的MLVD與患者年齡、性別、腫瘤直徑、臨床分期、乙肝病

5、毒病毒載量(HBVDNA)、AFP值等無關(guān)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2．LYVE—1標(biāo)記的肝細(xì)胞肝癌的微淋巴管密度也高于正常肝組織，肝細(xì)胞肝癌癌周組織MLND高于癌內(nèi)組織。在癌標(biāo)本中—高分化組及低分化組中MIND分別為8．86±2．78，11．31±3．15，兩組間比較P<0．05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；LYVE—1標(biāo)記的MLND在有淋巴轉(zhuǎn)移組、無淋巴轉(zhuǎn)移組分別為12．44±3．09，8．21±1．58，兩組間比較P<0．05，差

6、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肝癌Ⅰ—Ⅱ期及Ⅲ期組分別為12．97±4．17，9．51±3．42，兩組間有差異，P<0．05。LYVE—1標(biāo)記的肝細(xì)胞肝癌的MLVD與患者年齡、性別、腫瘤最大直徑、HBVDNA、AFP值等無關(guān)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3．52例肝癌組織中D2—40標(biāo)記的MLVD與LYVE—1標(biāo)記的MLND呈正相關(guān)，肝癌組織中檢測(cè)LYVE—1標(biāo)記的MLVD及D2—40標(biāo)記的MLVD對(duì)預(yù)測(cè)乙肝相關(guān)性肝癌的淋巴轉(zhuǎn)移均有一定的價(jià)值，

7、但淋巴轉(zhuǎn)移和分化組D2—40的陽性表達(dá)率和特異性要高于LYVE—1，而肝癌分期組LYVE—1陽性表達(dá)率要高于D2—40，P<0．05，兩者聯(lián)合檢測(cè)價(jià)值可能更大。
　　 結(jié)論：
　　 1．D2—40陽性染色呈棕黃色顆粒，主要位于癌周邊組織，而癌中心基本表達(dá)較少或者缺乏，它的特異性染色可以嚴(yán)格區(qū)分血管內(nèi)皮和淋巴管內(nèi)皮，特異性強(qiáng)。乙肝相關(guān)性肝癌癌組織中的MIND明顯多于正常肝組織，代表肝癌發(fā)生的過程中存在新生的微淋巴管。D2—

8、40標(biāo)記的MLVD與乙肝相關(guān)性肝癌的淋巴轉(zhuǎn)移、分化程度相關(guān)，提示微淋巴管形成可能與乙肝相關(guān)性肝癌的淋巴轉(zhuǎn)移和病情進(jìn)展有關(guān)。
　　 2．LYVE—1陽性染色亦呈棕黃色，位于癌周間質(zhì)淋巴管內(nèi)皮及癌內(nèi)一些腫瘤細(xì)胞的胞漿包膜，存在交叉反應(yīng)和非特異性染色。它標(biāo)記的MLVD與乙肝相關(guān)性肝癌的淋巴轉(zhuǎn)移、分化程度及臨床分期有關(guān)。提示微淋巴管可能與乙肝相關(guān)性肝癌的淋巴轉(zhuǎn)移和病情進(jìn)展有關(guān)，同時(shí)提示LYVE—1不是淋巴管內(nèi)皮高度特異的標(biāo)記物的最佳選擇