黑鰻藤C-,21-甾體苷類成分的免疫抑制作用研究.pdf

1、本項(xiàng)目研究了黑鰻藤新苷K對(duì)二硝基氟苯(DNFB)誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DTH)、大鼠同種異體皮膚移植排斥反應(yīng)以及小鼠OVA特異性免疫反應(yīng)的體內(nèi)免疫抑制活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示黑鰻藤新苷K可顯著降低耳廓腫脹度，抑制小鼠的遲發(fā)型超敏反應(yīng)，并與CsA作用相當(dāng)；大鼠同種異體皮膚移植排斥反應(yīng)顯示，黑鰻藤新苷K能明顯延長(zhǎng)移植皮片的存活時(shí)間，減少皮膚移植排斥反應(yīng)；黑鰻藤新苷K還能顯著地抑制ConA、LPS誘導(dǎo)的OVA免疫小鼠T、B淋巴細(xì)胞增殖和OVA誘

2、導(dǎo)的特異性淋巴細(xì)胞增殖，能使OVA免疫小鼠血清中的OVA特異性IgG抗體效價(jià)顯著降低。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，黑鰻藤新苷K可顯著抑制小鼠血清中OVA特異性抗體亞類IgG1和IgG2b的抗體效價(jià)水平；抑制OVA誘導(dǎo)的特異性Th1細(xì)胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2細(xì)胞因子(IL-4)的分泌。由此可以推測(cè)，黑鰻藤新苷K可通過(guò)抑制Th1、Th2細(xì)胞免疫反應(yīng)而抑制機(jī)體的抗原特異性細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答，從而有效緩解同種異體移植排斥反應(yīng)和抑制遲發(fā)型超

3、敏反應(yīng)。 為了進(jìn)一步探討該類C21甾體苷的作用機(jī)制，本項(xiàng)目選取了體外作用最為顯著，化學(xué)結(jié)構(gòu)與黑鰻藤新苷K相似的黑鰻藤新苷L，用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定了其對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞T細(xì)胞亞群CD4+、CD8+細(xì)胞的影響，用ELISA法測(cè)定了分泌的Th1/Th2細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ)含量，并用RT-PCR方法分析了Th1/Th2細(xì)胞因子及轉(zhuǎn)錄因子GATA-3、T-bet的基因表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，黑鰻藤新苷L可明顯減

4、少ConA誘導(dǎo)的CD4+T細(xì)胞的增殖，降低CD4+/CD8+T細(xì)胞的比例至正常水平；能使小鼠脾淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)上清液中Th1/Th2細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4的量呈濃度依賴性地降低。黑鰻藤新苷L還能濃度依賴性地顯著抑制ConA誘導(dǎo)的Th1/Th2細(xì)胞因子和調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子(T-bet、GATA-3)mRNA的高表達(dá)。由此表明，黑鰻藤新苷L能通過(guò)調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子T-bet和GATA-3的mRNA表達(dá)而影響Th1和Th2細(xì)胞因