TLR4在慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌中的作用.pdf

1、第一部分慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌的改變 目的：觀察慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌的改變。 方法：清潔級Wistar大鼠18只隨機分為2組：正常對照組（NS組）6只和慢性支氣管炎組（LPS組）12只。通過檢測LPS組大鼠氣管注入脂多糖（LPS）200μg/200μl后支氣管肺泡灌洗液（BALF）炎癥細胞總數(shù)和白細胞分類計數(shù)，采用ELISA檢測BALF中的腫瘤壞死因子—α（TNF—α）水平，用阿爾辛

2、藍—過碘酸雪夫（AB—PAS）染色氣道杯狀細胞，免疫組織化學(xué)檢測肺組織中粘蛋白5ac（Muc5ac）的表達及熒光定量RT—PCR檢測Muc5acmRNA在肺內(nèi)的表達。 結(jié)果：慢性支氣管炎組大鼠BALF中的炎癥細胞總數(shù)、中性粒細胞、巨噬細胞、淋巴細胞分類，TNF—α水平，AB—PAS陽染面積，氣道Muc5ac蛋白和mRNA表達明顯高于正常對照組大鼠（P<0．01或P<0．05）。 結(jié)論：慢性支氣管炎大鼠出現(xiàn)以中性粒細胞、巨

3、噬細胞、淋巴細胞為主的慢性氣道炎癥，并出現(xiàn)氣道粘液高分泌改變，且與氣道炎癥關(guān)系密切。 第二部分TLR4在慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌中的作用及多粘菌素B干預(yù)的影響 目的：觀察TLR4在慢性支氣管炎大鼠氣道炎癥和氣道粘液高分泌中的作用及多粘菌素B干預(yù)的影響，并探討其可能的機制。 方法：清潔級Wistar大鼠42只隨機分為5組：正常對照組（NS組）6只，慢性支氣管炎組（LPS組）12只，多粘菌素B干預(yù)組（

4、LPS+PMB組）10只，多粘菌素B自身對照組（PMB組）8只，地塞米松干預(yù)組（LPS+DEX組）6只。測定BALF中炎癥細胞總數(shù)和白細胞分類計數(shù)，TNF—α含量，AB—PAS對氣道杯狀細胞進行染色，用免疫組織化學(xué)法檢測氣道Muc5ac和肺組織TLR2、TLR4蛋白的表達及熒光定量RT—PCR檢測Muc5acmRNA、TLR4mRNA在肺內(nèi)的表達。 結(jié)果：LPS組在BALF細胞總計數(shù)、中性粒細胞、TNF—α含量，及AB—PAS陽

5、染面積、粘蛋白Muc5ac、TLR2蛋白、TLR4蛋白及Muc5acmRNA、TLR4mRNA表達與LPS+PMB組、LPS+DEX組比較差異有顯著性（P<0．01或P<0．05），NS組和PMB組在上述指標則組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0．05）。 結(jié)論：TLR4可能介導(dǎo)慢性支氣管炎大鼠的慢性氣道炎癥反應(yīng)和導(dǎo)致氣道粘蛋白基因Muc5acmRNA的高表達和粘蛋白Muc5ac的高分泌。多粘菌素B可能通過抑制肺組織TLR4mRNA及其