大鼠腓腸肌calpains-calpastatin急性力竭運(yùn)動和重復(fù)運(yùn)動后變化規(guī)律的研究.pdf

1、鈣激活的中性蛋白酶(calpain)是細(xì)胞內(nèi)半胱氨酸非溶酶體酶，在體外可水解多種骨骼肌收縮蛋白并口骨架蛋白。廣泛參與了骨骼肌蛋白的降解、細(xì)胞周期的循環(huán)及細(xì)胞骨架的形成等過程。骨骼肌中主要表達(dá)廣泛存在的μ-calpain、m-calpain及它們的內(nèi)源性抑制劑calpastatin。另外，n-calpain也主要表達(dá)于骨骼肌中。不適應(yīng)的大強(qiáng)度運(yùn)動后骨骼肌蛋白代謝加強(qiáng)，骨骼肌出現(xiàn)損傷，但目前還未見到關(guān)于calpains的表達(dá)在運(yùn)動后的變化規(guī)

2、律及其與骨骼肌損傷之間關(guān)系的研究。 本試驗主要目的是研究急性力竭運(yùn)動和慢性重復(fù)運(yùn)動對大鼠腓腸肌中μ-calpain、 m-calpain、n-calpain及calpastatin表達(dá)的影響，分析它們與運(yùn)動量及肌肉損傷之間的關(guān)系。 方法：將128只大鼠隨機(jī)分為不運(yùn)動對照組、急性力竭運(yùn)動組和重復(fù)運(yùn)動組。急性力竭運(yùn)動組分別在運(yùn)動后即刻、2小時、6小時、12小時、24小時、48小時和72小時取材；重復(fù)運(yùn)動組又分為大運(yùn)動量和中等

3、運(yùn)動量組，均進(jìn)行3周、5周、7周和9周的重復(fù)運(yùn)動。各組分別在運(yùn)動后的相應(yīng)時間內(nèi)取材，進(jìn)行骨骼肌H&E染色，觀察骨骼肌損傷及炎癥反應(yīng)情況。用Rt-PCR方法檢測calpainS\calpastatin的mRNA表達(dá)情況，免疫印跡方法檢測calpains\calpastatin蛋白及活性表達(dá)。 結(jié)果顯示：運(yùn)動后骨骼肌出現(xiàn)了不同程度的炎癥反應(yīng)及損傷。calpastatin的mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)在各運(yùn)動組均顯著升高，而n-calpain

4、的mRNA及蛋白表達(dá)在各運(yùn)動組均出現(xiàn)下降的趨勢。m-calpain及μ-calpain的mRNA表達(dá)在運(yùn)動后與對照組相比沒出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異。m-calpain的活性在運(yùn)動后出現(xiàn)升高，而μ-calpain的活性在運(yùn)動后則出現(xiàn)下降趨勢。在急性力竭運(yùn)動組，μ-calpain活性的降低要早于n-calpain表達(dá)的下降。Calpains/calpastatin在運(yùn)動后的不同變化趨勢說明了它們在運(yùn)動性骨骼肌損傷中有著不同的作用機(jī)制。 本文推