精索靜脈曲張大鼠附睪低氧與功能變化的研究.pdf

1、目的： 觀察實驗性精索靜脈曲張大鼠附睪HIF-1α(低氧誘導因子α亞基)和P53的表達與附睪唾液酸、肉毒堿的含量變化，研究精索靜脈曲張后大鼠附睪組織的病理生理改變，探討低氧在精索靜脈曲張大鼠附睪功能變化中的作用及導致不育的可能機制。 研究方法: 30只雄性健康Wister大鼠，完全隨機分為實驗組：10只，部分接扎大鼠左腎靜脈，建立精索靜脈曲張模型，模型建立49天后處死)，假手術組(10只，所有手術操作同實驗組，而

2、不接扎左腎靜脈，手術操作49天后處死)和對照組(10只，不行任何操作，飼養(yǎng)49天后處死)，根據模型建立成功與否以及是否符合納入標準，手術組、假手術組和對照組分別有7、9、7只被納入研究之內。取納入研究的動物左側附睪組織，沿縱軸切為兩半。一半用DTNB的方法檢測附睪組織中肉毒堿的含量； 5-甲基苯二酚法檢測附睪組織中唾液酸的含量；western blot的方法檢測附睪組織中HIF-1a蛋白的表達并對其進行定量分析；另一半4％多聚甲醛固定2

3、4小時后，以免疫組化的方法檢測附睪組織中HIF-1α蛋白的表達；免疫組化的方法檢測附睪組織中P53的表達。 結果: Western blot檢測的實驗組大鼠附睪組織HIF-1α的表達明顯高于對照組和假手術組(P＜0.05)；而對照組和假手術組無明顯區(qū)別(P＞0.05)。免疫組化檢測的實驗組大鼠附睪和睪丸組織HIF-1α的表達明顯高于對照組(P<0.001)和假手術組(P<0.001)；假手術組與對照組無明顯差別(P>0.

4、05)。實驗組附睪中唾液酸、肉毒堿含量均顯著低于對照組和假手術組(P<0.05)，而對照組與假手術組無明顯差別(P>0.05)；實驗組附睪組織HIF-1α的相對灰度值與唾液酸、肉毒堿含量呈顯著負相關(P<0.05)；實驗組大鼠左側附睪上皮p53的表達陽性率顯著高于對照組和假手術組(P<0.05)，對照組和實驗組無明顯區(qū)別(P>0.05)。 結論: 1.實驗性精索靜脈曲張可顯著減少附睪組織中對精子成熟具有重要作用的唾液酸、

5、肉毒堿的分泌，進而使精子成熟功能障礙，影響受精的完成并最終導致不育。 2.附睪組織中低氧標記物HIF-1α的表達明顯上調表明，與精索靜脈曲張對睪丸的影響相似，精索靜脈曲張在使附睪功能降低的同時還可導致附睪組織的低氧。 3.附睪組織的HIF-1α表達量與附睪組織唾液酸、肉毒堿的含量呈顯著負相關性，即HIF-1α表達量所代表的低氧可導致附睪功能障礙。然而HIF-1α可通過誘導表達一系列的下游產物來改善組織對低氧的耐受能力，是

6、組織對低氧的一種重要耐受機制。但從最后附睪功能受損這一結果不難看出，在精索靜脈曲張的病理生理過程中，是以HIF-1α表達上調所介導的某種損害作用為主，而HIF-1α介導的代償作用則處于失代償狀態(tài)。由以往的知識可知，這種損害作用可能就是HIF-1α誘導的附睪上皮細胞的凋亡。這有待于進一步的研究證實。 4.實驗組大鼠左側附睪上皮p53的表達顯著升高，結合上面的結論不難看出，其在HIF-1α介導的附睪上皮的損害作用中發(fā)揮重要作用。既H