葡萄胎印跡基因的研究.pdf

1、研究目的： 確定葡萄胎的遺傳學(xué)起源，檢測在正常絨毛及不同遺傳學(xué)類型的葡萄胎中，印跡基因H19/IGF2甲基化狀態(tài)的差異及p57<'KIP2>、IGF2表達的差異。初步探討基因印跡異常在葡萄胎的發(fā)生及發(fā)展中的作用機理。 研究方法： 收集正常絨毛4例，葡萄胎新鮮組織、蠟塊或切片共28例并獲取雙親血樣，提取DNA后通過微衛(wèi)星多態(tài)性分析葡萄胎的遺傳學(xué)起源，對葡萄胎進行分組；以正常絨毛為對照，通過甲基化特異性PCR方法檢測

2、印跡基因H19/IGF2在各組中甲基化狀態(tài)的差異，通過免疫組化方法檢測p57<'KIP2>、IGF2在各組中表達的差異。 研究結(jié)果： 1．微衛(wèi)星多態(tài)性分析將未知遺傳學(xué)類型的23例葡萄胎分為1例 PHM和22例AnCHM，修正了組織病理學(xué)診斷。 2．MSP法檢測了在正常絨毛及不同類型葡萄胎中H19啟動子CpG島的甲基化狀態(tài)：DNA經(jīng)過亞硫酸氫鹽修飾后進行甲基化特異性 PCR擴增，葡萄胎及正常絨毛甲基化引物均有明顯的

3、特異MSP條帶；正常絨毛非甲基化引物有明顯的特異MSP條帶，PHM特異性條帶稍弱，CHM缺乏或僅有微弱特異性條帶。 3．p57<'KIP2>免疫組化染色顯示正常絨毛周圍的滋養(yǎng)細(xì)胞為強陽性表達；PHM為強陽性表達或稍弱；CHM(包括AnCHM和BiCHM)的絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞呈陽性表達，絨毛周圍的滋養(yǎng)細(xì)胞不表達或微表達。 4．IGF2免疫組化染色在絨毛及不同類型葡萄胎中為(+)～(+++)，陽性程度與其類型及預(yù)后無明顯相關(guān)性。

4、 結(jié)論： 1．通過微衛(wèi)星多態(tài)性分析，以遺傳學(xué)起源為基礎(chǔ)可以彌補組織病理學(xué)診斷的不足與錯誤，更準(zhǔn)確的將葡萄胎進行分類。 2．正常絨毛的啟動子CpG島部分甲基化，基因印跡正常存在；PHM啟動子CpG島部分甲基化，母系印跡保留；CHM的啟動子CpG島高甲基化，部分存在少量去甲基化，印跡丟失。 3．CHM(包括AnCttM和BiCHM)有明顯的p57<'KIP2>蛋白表達缺陷，PHM的p57<'KIP2>蛋白表達