NF-κB誘導(dǎo)的CBS表達(dá)上調(diào)參與糖尿病大鼠機(jī)械痛過敏.pdf

1、目的:痛性糖尿病周圍神經(jīng)病變(PDPN)是一種以疼痛為主要表現(xiàn)的常見的糖尿病神經(jīng)病變。目前，人們對(duì)疼痛產(chǎn)生的潛在機(jī)制了解尚不是很多，本研究的目的就是對(duì)參與到PDPN中的核因子κB（NF-κB）和胱硫醚-β-合成酶(CBS)進(jìn)行探討。
　　 方法:1．糖尿病大鼠機(jī)械痛過敏造模。雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠，體重160-180g，隨機(jī)分成鏈脲霉素（sTz）組和正常對(duì)照(CON)組，分別給予STZ（65mg/kg）和同

2、體積溶媒腹腔注射。2周后，只有空腹血糖(FBG)＞16.7mmol/l且機(jī)械性的腳爪撤回閾值(PWT)＜5g的大鼠才可用于進(jìn)一步的研究。繪制FBG、空腹體重(FBW)和PWT的時(shí)間過程曲線。2．應(yīng)用NF-κB的拮抗劑吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)阻斷STZ誘導(dǎo)的機(jī)械性痛覺過敏。所有符合標(biāo)準(zhǔn)的大鼠隨機(jī)分為生理鹽水(NS)組/50ul、PDTC0.lug/50ul組和PDTC1ug/50ul組。鞘內(nèi)注射給藥的模式為單獨(dú)一次和持續(xù)l周每日一

3、次。獲得每種給藥模式后的PWT時(shí)間過程曲線。3．蛋白質(zhì)免疫印跡分析法觀察分子的表達(dá)變化。提取大鼠的腰椎4-6(L4-6)段脊髓背根神經(jīng)節(jié)(DRG)神經(jīng)元進(jìn)行蛋白的半定量分析，分別觀察NF-κB、CBS在正常對(duì)照組和STZ組的表達(dá)，及CBS在STZ組、PDTC阻斷后的表達(dá)。
　　 結(jié)果:1．STZ誘導(dǎo)了糖尿病大鼠的機(jī)械性痛覺過敏。STZ組大鼠出現(xiàn)了明顯的多食、多飲、多尿伴體重減輕的表現(xiàn)，F(xiàn)BG明顯高于正常組，F(xiàn)BW和PWT明顯低于

4、正常組（P＜0.05），造模4周后PWT出現(xiàn)最低值。2．PDTC阻斷了STZ誘導(dǎo)的大鼠機(jī)械性痛覺過敏。與NS組相比，PDTC組大鼠的PWT均出現(xiàn)了升高(P＜0.05)，于給藥后2小時(shí)達(dá)到峰值，且連續(xù)一周給藥后1ug組PWT升高幅度更大，作用效果一直持續(xù)到給藥一周后的第四天（P＜0.05）。3．NF-κB和CBS在蛋白水平的變化。與正常對(duì)照組相比，STZ組大鼠NF-κB、CBS的表達(dá)顯著升高(P分別＜0.01和＜0.05)。經(jīng)過PDTC的