螺旋藻多糖對(duì)肝癌細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討不同劑量螺旋藻多糖(polysaccharide from Spirulina platensis，PSP)作用于體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞株BEL7404，通過(guò)抑制其增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從分子水平上探討其抗癌的可能機(jī)制，為其進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。 方法：采用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，光鏡觀(guān)察形態(tài)學(xué)變化，流式細(xì)胞術(shù)PI法檢測(cè)PSP對(duì)BEL7404細(xì)胞毒性；流式細(xì)胞儀TUNEL法檢測(cè)PSP誘導(dǎo)BEL7404細(xì)胞的凋亡

2、情況；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)PSP處理人肝癌BEL7404細(xì)胞后，Bax、Bcl-2、Apaf-1蛋白的表達(dá)情況；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞Caspase-3的活化程度。 結(jié)果：①300μg/ml～100μg/ml螺旋藻多糖對(duì)BEL7404細(xì)胞有殺傷作用，PSP與細(xì)胞抑制之間具有劑量依賴(lài)性。②倒置顯微鏡觀(guān)察：濃度≥300μg/ml，BEL7404細(xì)胞胞質(zhì)混濁，細(xì)胞多呈圓形，體積縮小，折光性差，貼壁性能減弱，細(xì)胞克隆生長(zhǎng)狀態(tài)受到破壞而散開(kāi)

3、，并出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片及懸浮、脫落的細(xì)胞。③流式TUNEL法檢測(cè)300μg/ml、50μg/ml PSP作用24h，BEL7404細(xì)胞凋亡率分別為(20.7±8.1)％，(22.3±8.3)％。④免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示PSP使BEL7404細(xì)胞Bax、Apaf-1蛋白表達(dá)升高，Bcl-2蛋白表達(dá)下降。⑤流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Caspase-3活性結(jié)果表明，隨著螺旋藻多糖濃度的增加，Caspase-3明顯活化，并且濃度越高越明顯。 結(jié)論：①P