突發(fā)事件人員救護中血液中性粒細胞快速測定方法的探討.pdf

1、目的：近年來自然災害頻繁發(fā)生，如雪災、地震、海嘯等給各國、各地區(qū)的人民造成了巨大的傷痛和損失。如何在這些重大災難發(fā)生現場展開及時有效的救治工作已成為我們面臨的一項緊迫任務，在應急處理過程中，急性感染尤其是急性化膿性感染、嚴重的組織損傷等這些災害現場常出現病理中性粒細胞增多，因此快速準確地檢測中性粒細胞數目對于上述疾病診斷和病情估計具有決定意義。POCT是一種近年來強勢發(fā)展的在患者身邊分析患者樣品的檢測技術，其主要特點是操作簡單、使用方便

2、。因此，本課題從有效反映受傷人員感染的血液中性粒細胞入手，最終目標為研制出一種便攜、操作簡單、無需電力供應、無需專用場地、快速準確、樣本微量化的檢測血液中性粒細胞的POCT產品。
　　 方法：
　　 1.Percoll分離中性粒細胞采用加用葡聚糖和不加用葡聚糖的兩種Percoll密度梯度離心法，比較兩種方法的優(yōu)缺點，選擇其中較好的方法為后續(xù)實驗使用高純度的中性粒細胞做準備。
　　 2.中性粒細胞中酯酶活性的測定參

3、考骨髓粒細胞特異性酯酶染色方法及尿干化學試紙條檢測粒細胞酯酶的方法，從而選擇一種能夠反映血液中性粒細胞數量的方法。
　　 結果：不加葡聚糖的Percoll密度梯度離心法簡便省時、分離效果好、提取細胞純度高、細胞活性達99％以上。采用尿干化學試紙條可檢測血液樣本中的中性粒細胞，而骨髓粒細胞特異性酯酶染色方法不能用于測定血液中性粒細胞的數量。進一步研究尿干化學試紙條用于稀釋血液樣本中性粒細胞的檢測，結果發(fā)現試紙條上白細胞模塊顏色的深

4、淺隨著中性粒細胞稀釋液濃度（0-500/μl）的變化而變化。
　　 結論：
　　 1、不加葡聚糖的Percoll密度梯度離心法簡便省時、提取細胞純度高、細胞存活率高，為后續(xù)實驗研究中性粒細胞做好了準備。
　　 2、采用尿干化學試紙條可檢測血液樣本中的中性粒細胞，但是僅限于中性粒細胞濃度為0-500/μl的稀釋血液樣本。而血液樣本中性粒細胞的濃度遠大于此值，故在后續(xù)實驗中將以此方法為基礎，探討通過調整試紙條上與粒細