透皮肽TD-1作用機(jī)理的研究及細(xì)胞自噬相關(guān)初步研究.pdf

1、第一部分透皮肽TD-1作用機(jī)理的研究
　　藥物通過(guò)皮膚表面進(jìn)入全身循環(huán)為人們提供了一個(gè)方便的獲得各種各樣的療效的給藥途徑。透皮給藥被認(rèn)為是傳統(tǒng)給藥方式的一個(gè)有效補(bǔ)充。
　　已有研究證明透皮肽TD-1可以促進(jìn)透皮給藥，幫助蛋白或藥物經(jīng)過(guò)皮膚進(jìn)入體內(nèi)。透皮肽可能為大分子藥物創(chuàng)建了一個(gè)短暫性開(kāi)放的皮膚通道使其達(dá)到全身血液循環(huán)。不過(guò)到目前為止，TD-1打開(kāi)皮膚屏障這一過(guò)程的確切機(jī)制依然還不清楚，TD-1結(jié)合的蛋白質(zhì)也沒(méi)得到具體的研究

2、。
　　第一部分中我們通過(guò)酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)透皮肽TD-1是與皮膚中大量存在的ATP1B1蛋白特異性結(jié)合。而且體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)還證明透皮肽TD-1通過(guò)ATP1B1的C端與之緊密結(jié)合。進(jìn)一步數(shù)據(jù)表明這種結(jié)合會(huì)影響到ATP1B1在皮膚組織和表皮細(xì)胞中的定位，并且對(duì)ATP1B1在細(xì)胞中的表達(dá)量有一定的影響，甚至這種相互作用與TD-1的促進(jìn)透皮功能有一定相關(guān)性。
　　我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果首次提出了透皮肽TD-1具有通過(guò)與蛋白ATP1B1的作用

3、來(lái)調(diào)節(jié)透皮過(guò)程這一新的生物學(xué)功能，揭示了透皮肽TD-1作為透皮給藥佐劑的機(jī)制與原理，為其應(yīng)用提供了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)和依據(jù)。
　　第二部分細(xì)胞自噬相關(guān)的初步研究
　　細(xì)胞自噬是進(jìn)化中高度保守的一種自身調(diào)節(jié)和刺激應(yīng)答的調(diào)控機(jī)制，在機(jī)體的免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、腫瘤、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病等的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有十分重要的作用?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有約34種自噬相關(guān)蛋白參與細(xì)胞自噬過(guò)程，通過(guò)與蛋白的相互作用行使正常調(diào)節(jié)功能。已有研究證明多種納米材

4、料和病毒都能引發(fā)明確的靜態(tài)自噬特征。
　　本文第二部分通過(guò)酵母雙雜交技術(shù)分別篩選了與幾種細(xì)胞自噬過(guò)程重要蛋白ATG5、BECN1、DRAM的相互作用蛋白，并且在觀察了它們與互作蛋白在細(xì)胞中的共定位情況。本文還發(fā)現(xiàn)合成的PDMAEMA材料也能獨(dú)立引發(fā)細(xì)胞中的自噬過(guò)程。而且這種自噬現(xiàn)象的發(fā)生使得材料這些材料對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)存活有很大的影響。
　　我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果第一次發(fā)現(xiàn)自噬蛋白ATG5、BECN1、DRAM的一些相互作用蛋白，為自噬