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文檔簡(jiǎn)介
1、高血壓是一種發(fā)病率、致殘率、死亡率較高的疾病。目前的降血壓的化學(xué)合成藥物大都存在作用時(shí)間短、毒副作用大、依賴性較強(qiáng),治療效果存在局限性等問(wèn)題。我國(guó)醫(yī)學(xué)典籍中關(guān)于中藥降血壓的記載頗多,中藥資源豐富,價(jià)格低廉,且其毒副作用小。
現(xiàn)在藥理學(xué)研究表明,菊花提取物(Chrysanthemummorifoliumextract,CME)具有治療心血管系統(tǒng)疾病的作用。對(duì)菊花進(jìn)行初步的研究,篩選降血壓的有效部位,開發(fā)降血壓新藥。有非常重要
2、的現(xiàn)實(shí)意義。
本研究的主要內(nèi)容有:(1)采用血管緊張素轉(zhuǎn)化酶-底物-血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACE-HHL-ACEI)反應(yīng)體系,以高效液相色譜法測(cè)定反應(yīng)體系中馬尿酸含量,衡量ACE抑制劑的活性,追蹤菊花降血壓有效部位;(2)比較菊花的水、50%乙醇和95%乙醇提取物對(duì)ACE抑制作用的活性;(3)采用石油醚、乙酸乙酯和丙酮有機(jī)溶劑初步萃取分離菊花95%乙醇提取物,并研究丙酮萃取的丙酮用量、不同時(shí)間和不同溫度所得的萃取物對(duì)AC
3、E抑制作用的影響;(4)采用硅膠柱層析和半制備高效液相色譜進(jìn)行進(jìn)一步分離提純菊花中丙酮萃取物;(5)將有效部位的成分的定性檢測(cè)和降高血壓的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。
通過(guò)以上實(shí)驗(yàn),得到以下研究結(jié)果:
(1)高效液相色譜法測(cè)定ACE-HHL-ACEI反應(yīng)體系中馬尿酸含量,馬尿酸的峰面積與濃度的線性關(guān)系的相關(guān)系數(shù)r=0.9996,馬尿酸的加樣回收率為97.889%~105.061%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.53%,精密度
4、的相對(duì)偏差(RSD)為1.97%。
(2)菊花95%乙醇提取物的IC50為70.52±2.04mg/mL,比50%乙醇提取和水提物對(duì)ACE抑制作用的活力強(qiáng)(P<0.05)。
(3)通過(guò)石油醚、乙酸乙酯和丙酮有機(jī)溶劑對(duì)菊花95%乙醇提取物初步萃取分離,得到丙酮萃取物的IC50為14.47±1.26mg/mL。比95%乙醇提取物對(duì)ACE抑制作用的活性明顯增強(qiáng)(P<0.01)。
(4)通過(guò)硅膠柱層析的
5、方法對(duì)丙酮萃取物進(jìn)行再次分離,得到對(duì)ACE抑制作用最強(qiáng)的甲醇洗脫部位(組分5),該部位的IC50為0.71±0.05mg/mL,對(duì)ACE抑制作用的活性進(jìn)一步增強(qiáng)(與丙酮萃取物比較,P<0.01),然而半制備高效液相分離該部位,獲得的18個(gè)化合物對(duì)ACE抑制作用的活性沒(méi)有繼續(xù)增強(qiáng)。說(shuō)明菊花降血壓的有效部位是甲醇洗脫部位(組分5)。
(5)通過(guò)對(duì)甲醇洗脫部位化學(xué)成分的定性檢測(cè),可知有效部位為黃酮類化合物。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明低劑量
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