他達(dá)拉非對阿霉素心肌病的預(yù)防保護(hù)作用及其機(jī)制.pdf

1、目的:
　　 研究他達(dá)拉非對小鼠阿霉素所致心肌病的保護(hù)作用，探討其可能的作用機(jī)制，來尋找一種新的預(yù)防阿霉素所致心肌病的治療藥物，為阿霉素的臨床應(yīng)用及阿霉素所致心肌病的治療提供一種新的治療方法。
　　 方法:
　　 雄性10周齡C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為阿霉素組(DOX，n=16):采用一次性腹腔內(nèi)注射阿霉素(DOX，15mg/kg)誘導(dǎo)小鼠阿霉素心肌病模型;阿霉素加他達(dá)拉非組(DOX+Tad，n=16):一次性

2、腹腔內(nèi)注射等同劑量阿霉素的同時給予他達(dá)拉非灌胃(Tad，4mg/kg，日一次，共14天);正常組(Con，n=10):用相同容量的生理鹽水代替阿霉素一次性腹腔內(nèi)注射。正常飼養(yǎng)2周后對存活小鼠進(jìn)行心臟超聲檢查，包括左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)、射血分?jǐn)?shù)(EF)和短軸縮短率(FS);心臟組織進(jìn)行HE和Masson氏染色，計(jì)算各組小鼠心肌細(xì)胞大小和纖維化面積;心肌進(jìn)行TUNEL檢測，計(jì)算各組小鼠心肌細(xì)胞凋亡指

3、數(shù);ELISA法檢測各組小鼠心肌組織中cGMP的表達(dá)情況;利用Western Blot檢測各組小鼠心肌組織中MHC、Troponin(I)、和Desmin三種蛋白的表達(dá)情況。將各實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，以O(shè)ne-wayANOVA分析各組別之間的差異，各組間的比較采用SNK檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)果:
　　 與正常組相比，阿霉素組小鼠心臟普遍擴(kuò)大，呈普大型心，心臟室

4、壁運(yùn)動明顯減弱，表現(xiàn)為LVEDD和LVESD明顯增加(P＜0.05)、LVEF及％FS明顯下降(P＜0.05)，給予他達(dá)拉非后以上四項(xiàng)指標(biāo)明顯優(yōu)于DOX組，提示心功能受到很好的保護(hù);阿霉素組小鼠心肌細(xì)胞排列紊亂，部分心肌細(xì)胞斷裂、丟失，呈空泡樣變性，細(xì)胞間隙明顯變大，萎縮心肌細(xì)胞增多，給予他達(dá)拉非后，上述改變明顯減輕，心肌細(xì)胞趨于正常;Masson染色結(jié)果顯示，阿霉素組藍(lán)染的心肌纖維化顯著增加，給予他達(dá)拉非后，雖然細(xì)胞間質(zhì)纖維化比正常組

5、有所增多，但較阿霉素組明顯減少(P＜0.05)，分布較均勻，沒有明顯聚集性分布現(xiàn)象;ELISA結(jié)果顯示，阿霉素組心肌組織cGMP表達(dá)水平明顯低于正常對照組(P＜0.05)，應(yīng)用他達(dá)拉非治療2周后，小鼠心肌組織cGMP表達(dá)水平均得到改善(P＜0.05);Western blot結(jié)果顯示，阿霉素組心肌組織MHC、Troponin(I)、Desmin蛋白表達(dá)較正常對照組明顯減低(P＜0.05)，給予他達(dá)拉非治療后小鼠心肌組織MHC、Tropo

6、nin(I)、Desmin蛋白表達(dá)較阿霉素組明顯升高(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.阿霉素腹腔注射可成功建造阿霉素心肌病小鼠模型。
　　 2.cGMP信號通路以及MHC、Troponin(I)、Desmin三種蛋白可能在阿霉素心肌病的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要的作用。
　　 3.他達(dá)拉非可能通過激活cGMP通路減弱阿霉素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞萎縮和心肌纖維化，明顯改善阿霉素誘導(dǎo)的小鼠左心室功能障礙，對阿霉