CYP2B6、CYP2C8、MDR1基因多態(tài)性對異維A酸人體藥代動力學(xué)的影響.pdf

1、異維A酸具有調(diào)節(jié)皮脂腺分泌、改變?nèi)梭w分泌皮脂成分、抑制中性粒細胞趨化、抑制痤瘡丙酸桿菌增殖以及調(diào)節(jié)毛囊異常角化等藥理作用，成為臨床治療中重度痤瘡的一線藥物。多年的臨床治療發(fā)現(xiàn)，部分病人療效不盡如人意，而且與病情的輕重程度無關(guān)。異維A酸人體藥動學(xué)研究結(jié)果，人體藥動學(xué)參數(shù)有較大的個體差異。異維A酸在人體內(nèi)經(jīng)細胞色素酶首先代謝為4-OH-13-cis-RA，而后轉(zhuǎn)變?yōu)?-OXO-13-cis-RA。參與代謝的肝細胞色素酶有CYP2B6、CYP

2、2C8、CYP3A4、CYP2A6等。藥物轉(zhuǎn)運蛋白P-糖蛋白（P-gp）是多藥耐藥基因（Multidrug resistance1，MDR1）的產(chǎn)物，它可作用底物由細胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)運至細胞膜外從而影響藥物的體內(nèi)吸收過程。國內(nèi)外多有研究報道細胞代謝色素酶P450及藥物轉(zhuǎn)運蛋白基因多態(tài)性可影響藥物的體內(nèi)過程，導(dǎo)致血藥濃度及臨床療效的差異。本研究立足于異維A酸藥代動力學(xué)個體間差異，探尋參與異維A酸體內(nèi)吸收及代謝過程的多種代謝酶和轉(zhuǎn)運蛋白P-gp的基

3、因多態(tài)性對其人體藥動學(xué)過程的影響。實驗研究分為三個部分。
　　 第一章異維A酸膠丸的人體藥代動力學(xué)研究
　　 目的：高效液相色譜-質(zhì)譜法（LC/MS）法研究健康志愿者單次口服血漿異維A酸膠丸后，異維A酸在人體內(nèi)的藥代動力學(xué)行為，為后續(xù)藥物基因組學(xué)研究提供資料。方法：21例健康男性受試者空腹口服異維A酸膠丸40mg（4粒），給藥后0、0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、24、36、60h靜脈采血，LC/M

4、S法測定血漿中異維A酸濃度。測得的血藥濃度-時間數(shù)據(jù)采用BAPP2.2商品軟件處理，求算主要藥動學(xué)參數(shù)及各參數(shù)的變異。結(jié)果：21例受試者單次口服40mg異維A酸膠丸后的主要藥代動力學(xué)參數(shù)為：血藥峰濃度Cmax834.3±221.9ng/ml（RSD26.59％）；血藥濃度達峰時間17max2.79±1.16h（RSD41.58％）；消除半衰期h1/218.05±4.63h（RSD25.68％）；平均滯留時間MRT23.58±6.39h（

5、RSD27.11％）；藥-時曲線下面積AUC0-6010073.5±3038.6ng·h/mL（RSD30.16％）。結(jié)論：21例男性健康受試者藥動學(xué)參數(shù)與文獻結(jié)果一致，但個體間藥動學(xué)參數(shù)有很大差異。
　　 第二章 CYP2B6與CYP2C8基因多態(tài)性與異維A酸人體代謝動力學(xué)差異相關(guān)性研究
　　 目的：探討細胞色素P450（CYP2B6*4、CYP2B6*6、CYP2C8*3）基因多態(tài)性與異維A酸人體代謝動力學(xué)個體差異的

6、相關(guān)性。方法：21例健康男性受試者外周血基因組DNA采用普通聚合酶鏈式反應(yīng)及限制性核酸內(nèi)切酶片段分析方法（PCR-RFLP）分析CYP2B6exon4G516T，、CYP2B6exon5 A785G、CYP2C8*3位點G416A和位點A1196G的基因分型；根據(jù)等位基因單個突變或聯(lián)合突變原理，確定受試者人群中CYP2B6兩種等位基因CYP2B6*4、CYP2B6*6及等位基因CYP2C8*3的分型，比較不同基因型組間藥動學(xué)參數(shù)差異。結(jié)

7、果：21例健康受試者CYP2B6 exon4及exon5存在明顯的連鎖不平衡性。等位基因CYP2B6*4野生型*1/*1為12例（57.14％），雜合型*1/*4為6例（28.57％），突變型*4/*4為3例（14.29％）；等位基因CYP2B6*6野生型*1/*1為13例（61.90％），雜合型*1/*6為5例（23.81％），變異型*6/*6為3例（14.29％）。等位基因CYP2B6*4野生型體內(nèi)消除參數(shù)t1/2及MRT高于突變型

8、（P值分別為0.023、0.033），吸收參數(shù)Cmax、Tmax及AUC等兩組無統(tǒng)計學(xué)差異。等位基因CYP2B6*6的野生型與突變型各項藥動學(xué)參數(shù)均未見有統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。21例健康受試者均未檢出有等位基因CYP2C8*3的突變。結(jié)論：①主要代謝酶CYP2B6等位基因*4突變與異維A酸體內(nèi)代謝相關(guān)，CYP2B6*4突變型可能為異維A酸快代謝型人群。②CYP2C8*3具功能意義的突變在本次試驗受試者中不存在。
　　 第三

9、章 MDR1基因多態(tài)性與異維A酸人體代謝動力學(xué)差異相關(guān)性研究
　　 目的：探討編碼P-gp的MDR1基因多態(tài)性與異維A酸人體代謝動力學(xué)個體差異的相關(guān)性。方法：21例健康男性受試者外周血基因組DNA采用等位基因特異擴增法（allele-specificamplification，ASA-PCR）對MDR1 exon12（C1236T）、exon21（G2677T/A）及exon26（C3435T）位點進行基因分型分析，比較不同基因

10、型組間藥動學(xué)參數(shù)的差異。結(jié)果：MDR1C1236T變異型組Cmax、Tmax明顯高于MDR1C1236T野生型組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P值分別為0.057、0.252）；AUC0-60顯著高于野生型組，且具有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.049）；消除動力學(xué)參數(shù)t1/2及MRT變異型組小于野生型組（P值分別為0.011、0.035）。MDR1 G2677T/A雜合型、變異型兩組間各藥代動力學(xué)參數(shù)均無顯著差異。MDR1C3435T變異型組Cmax明