PLK1和Survivin在直腸癌中表達(dá)的研究.pdf

1、背景與目的:
　　 近年隨著腫瘤分子生物學(xué)的進(jìn)展,人們逐漸認(rèn)識到腫瘤的發(fā)生與很多因素有關(guān),如癌基因的激活和抑癌基因的失活、腫瘤新生血管的形成、細(xì)胞周期調(diào)控異常等,其實質(zhì)為細(xì)胞增殖分化的異常所導(dǎo)致。細(xì)胞周期調(diào)控使細(xì)胞的增殖、分化與凋亡相互連成一體,在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著作用。
　　 PLK1(polo—like kinase1)是一種高度保守絲氨酸／蘇氨酸激酶,屬于Polo樣激酶家族中的成員之一。PLK1在正常細(xì)胞周期中

2、發(fā)揮重要的調(diào)控作用,參與中心體的成熟、紡錘體的形成、染色質(zhì)的分離、胞質(zhì)分裂以及在G2／M期的轉(zhuǎn)化等細(xì)胞周期一系列事件的調(diào)控。PLK1還介導(dǎo)了DNA損傷后的DNA修復(fù)及細(xì)胞分裂阻滯,減少了DNA損傷誘導(dǎo)的突變發(fā)生。
　　 Suvrivin屬凋亡抑制蛋白(inhiotro of apoptosis poretin,IAP)家族中的成員,能夠抑制細(xì)胞凋亡,促進(jìn)細(xì)胞增殖。還參與細(xì)胞周期G2／M期的轉(zhuǎn)化及腫瘤血管的生成調(diào)控。近年發(fā)現(xiàn)兩者在

3、人類許多種惡性腫瘤中都呈過度表達(dá)。兩者的異常表達(dá)均與腫瘤的惡性生物學(xué)行為關(guān)系密切。有研究發(fā)現(xiàn),PLK1與Survivin兩者可能都通過caspase-3來調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和凋亡,但這一過程中具體的作用機制尚不清楚。本實驗采用RT—PCR方法檢測PLK1與Survivin在直腸癌中的表達(dá)情況,探討它們在直腸癌的發(fā)生和發(fā)展中的作用以及兩者之間的相關(guān)聯(lián)系。以待能在臨床工作中為直腸癌的診斷、治療及預(yù)后判斷提供一些新的思路。
　　 材料與方

4、法:
　　 選取2009年7月至2010年7月鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院普通外科手術(shù)切除的45例直腸癌標(biāo)本為研究對象。均為原發(fā)病例,術(shù)前均經(jīng)纖維結(jié)腸鏡及病理論斷為直腸癌,均未行放化療治療。所取標(biāo)本在切除后45分鐘內(nèi)迅速放入液氮罐內(nèi)凍存,然后放入-80℃冰箱內(nèi)保存。依據(jù)Dukes’分期劃分,其中A期6例,B期15例,C期24例。同時選取19例經(jīng)快速冰凍病理檢查證實為正常粘膜組織作為對照。采用RT—PCR方法檢測PLK1基因和Surviv

5、in基因的mRNA在19例正常粘膜組織和45例直腸癌組織的表達(dá)量。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件行統(tǒng)計學(xué)處理,檢驗水準(zhǔn)取a=0.05。
　　 結(jié)果:
　　 1.RT-PCR檢測結(jié)果:PLK1 mRNA在直腸癌癌組織、正常組織、浸潤至漿膜內(nèi)、外組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的表達(dá)量分別為2.113±0.269、0.601±0.085、2.019±0.211、2.195±0.291、2.195±0.259、2.026±0.

6、258,PLK1 mRNA在癌組織與正常組織之間,漿膜內(nèi)、外組之間,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間均有明顯差異(P<0.05)；PLK1 mRNA的表達(dá)量在Dukes’C期組、B期組及A期組分別為2.269±0.223、2.020±0.160、1.717±0.793,F=22.621,組間比較也存在明顯差異(P<0.05)。
　　 Survivin mRNA在直腸癌Dukes’C期組、B期組及A期組的表達(dá)量分別為1.975±0

7、.194、1.780±0.151、1.536±0.087,F=17.836,組間比較存在明顯的差異(P<0.05)；在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)量分別為1.922±0.214、1.778±0.221,兩組間差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),
　　 2.相關(guān)性分析:直腸癌中PLK1 mRNA的表達(dá)量隨著腫瘤分期的進(jìn)展及浸潤轉(zhuǎn)移,標(biāo)本中PLK1的表達(dá)量逐漸增多,同樣Suvrivin mRNA表達(dá)量也隨著腫瘤分期的進(jìn)展表達(dá)

8、量逐漸增多,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,二者呈低度正相關(guān),Pearson相關(guān)系數(shù)為0.365(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.PLK1及Survivin在直腸癌的發(fā)生發(fā)展中起著作用,檢測兩者的表達(dá)有助于診斷。
　　 2.在直腸癌中,PLK1的表達(dá)與浸潤深度、Dukes’分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),與患者的年齡、性別、腫瘤大小及分化程度均無相關(guān)性；Survivin的表達(dá)與Dukes’分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),而與患者的年齡、性別