銀杏葉標(biāo)準(zhǔn)提取物對急性期梗死心肌移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、目的: 探討銀杏葉標(biāo)準(zhǔn)提取物EGB761（extract of Ginkgo Biloba，EGB761）對大鼠急性期梗死心?。╝cute myocardial infarction，AMI）移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone mesenchymal stem cells，BMSCs）的心肌微環(huán)境、移植BMSCs的存活、分化及心功能的影響。
　　 方法：建立大鼠MI模型，5-0醫(yī)用無損傷縫線結(jié)扎冠狀動脈左前降支(left anter

2、ior descending，LAD)上中1/3 交界處，以心電圖顯示ST段抬高和肉眼可見左心室前壁暗紫為模型制作成功。經(jīng)心外膜下直接注射經(jīng)PKH-26標(biāo)記的SD大鼠BMSCs作為移植供體細(xì)胞（1×105cells）。
　　 將上述動物隨機(jī)分為兩組，A組：（EGB761處理組）細(xì)胞移植＋EGB761腹腔注射（100mg/kg.d）；B組：（對照組）：細(xì)胞移植＋生理鹽水腹腔注射（注射體積同EGB761處理組），每組15只。

3、　　 各組于術(shù)后1d、2d、7d取材。HE染色觀察心肌梗死區(qū)及邊緣區(qū)炎性細(xì)胞浸潤，酶促反應(yīng)和氧化產(chǎn)物吸光度法檢測梗死心肌超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性和氧化應(yīng)激產(chǎn)物丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，Western Blot法檢測組織中凋亡相關(guān)蛋白Fas表達(dá)、Tunel法檢測梗死心肌中移植細(xì)胞凋亡情況，免疫熒光雙標(biāo)法觀察梗死心肌中移植細(xì)胞的分化，同時，測定給藥后大鼠心功能變化。

4、
　　 結(jié)果：
　　 1. HE染色觀察顯示，術(shù)后1d、2d、7d，實(shí)驗(yàn)組梗死心肌組織炎癥細(xì)胞浸潤逐漸減輕，對照組梗死心肌組織炎癥細(xì)胞的浸潤則進(jìn)行性加重；于術(shù)后相應(yīng)的時間點(diǎn)，與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組中炎癥細(xì)胞浸潤明顯減輕，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 2. 酶促反應(yīng)和氧化產(chǎn)物吸光度檢測結(jié)果顯示，術(shù)后1d、2d、7d，實(shí)驗(yàn)組梗死心肌組織SOD活性逐漸升高，而對照組梗死心肌組織中SOD活性逐漸降低；于術(shù)后相應(yīng)

5、的時間點(diǎn)與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組SOD活性顯著升高（P＜0.05）。
　　 術(shù)后1d、2d、7d，實(shí)驗(yàn)組梗死心肌組織中MDA含量漸減少，對照組梗死心肌組織中MDA含量漸增多；于術(shù)后相應(yīng)的時間點(diǎn)，與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組MDA含量明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 3. Fas蛋白檢測結(jié)果顯示，術(shù)后1d、2d、7d，實(shí)驗(yàn)組Fas蛋白的表達(dá)逐漸減少，對照組Fas蛋白的表達(dá)逐漸增多；于術(shù)后相應(yīng)時間點(diǎn)1d、2d、7d，與

6、對照組比較，實(shí)驗(yàn)組Fas蛋白的表達(dá)明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 4. 移植的BMSCs凋亡比率測定結(jié)果，術(shù)后1d、2d、7d，兩組中移植的BMSCs凋亡比率漸增加；于術(shù)后相應(yīng)時間點(diǎn)1d、2d、7d，與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組梗死心肌中BMSCs的凋亡比率明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 5. 移植的BMSCs分化檢測結(jié)果，實(shí)驗(yàn)7d組BMSCs胞漿中有cTnI表達(dá)，而對照組BMSCs胞漿中

7、未見cTnI表達(dá)。
　　 6. 移植BMSCs心肌梗死大鼠的心臟功能測定結(jié)果，術(shù)后1d、2d、7d，實(shí)驗(yàn)組左室±dp/dtmax逐漸增加，對照組中大鼠左室±dp/dtmax逐漸降低；于術(shù)后相應(yīng)時間點(diǎn)1d、2d、7d，與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組左室±dp/dt增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 結(jié) 論:
　　 1. EGB761可減輕急性期梗死心肌移植BMSCs心肌局部的炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)，減少移植BMSCs