中成藥的多指標(biāo)分析及其在質(zhì)量控制中的應(yīng)用.pdf

1、中成藥是指以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，以中藥材為原料，按規(guī)定的處方和工藝加工成一定劑型的、供臨床使用的藥物。目前，中成藥的質(zhì)量控制多模仿化學(xué)合成藥物的質(zhì)量控制模式，即以已知的某一單一活性成分或指標(biāo)成分為控制質(zhì)量的指標(biāo)，用以定性和定量分析，借以判斷藥品是否“合格”。而這種模式半個(gè)多世紀(jì)一直作為中成藥質(zhì)量的主要模式，其變化只是分析手段和測定指標(biāo)的更迭。當(dāng)然中藥的作用并不是多種活性成分的簡單相加，尤其是中成藥(大多為復(fù)方制劑)更是如此，中成藥的療效是

2、多種成分協(xié)同作用的結(jié)果，因此模仿化學(xué)藥質(zhì)量控制的模式解決中藥質(zhì)量控制的問題越來越顯露出它的不足。復(fù)方中藥各味藥的劑量和比例會(huì)影響其藥效是一個(gè)不爭的事實(shí)，而多指標(biāo)的質(zhì)量控制方法不僅能反映制劑的工藝水平，且能在一定程度上反映所用藥材的質(zhì)量，同時(shí)指標(biāo)成分的分離測定還可以反映傳統(tǒng)中藥的配伍狀況，更符合中醫(yī)理論。因此對中成藥進(jìn)行多指標(biāo)的質(zhì)量控制能更好地表征其質(zhì)量。但由于中成藥本身的特殊性，如化學(xué)成分復(fù)雜、溶解性差別較大、指標(biāo)成分含量較低，給其多組

3、分的提取以及同時(shí)分離測定帶來了一定的困難。 本文采用HPLC法對中成藥多指標(biāo)成分提取方法、檢測方法、體外溶出和體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)的研究，建立了適合中成藥多指標(biāo)成分的檢查體系，并利用該體系考察了多個(gè)廠家三黃片、清胃黃連、功勞去火片的多指標(biāo)成分含量、功勞去火片多指標(biāo)成分的體外溶出和藥代動(dòng)力學(xué)的情況。研究結(jié)果表明：(1)采用靈敏度高，專屬性強(qiáng)、特異性好的。HPLC法測定中成藥中的多種指標(biāo)成分既能夠達(dá)到中藥含量檢測的要求，又能使被測成分和其

4、他組分分離，不干擾其測定。(2)不同廠家的同一中藥制劑(三黃片)的主要指標(biāo)成分含量差別較大，反映在療效也必然會(huì)有所差別，因此用多指標(biāo)成分來表征三黃片的質(zhì)量更科學(xué)、更合理。(3)多指標(biāo)成分評價(jià)功勞去火片溶出度方法的建立，全面地評價(jià)了其體外溶出情況，為評價(jià)和控制功勞去火片的質(zhì)量提供了依據(jù)。(4)大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)的研究表明復(fù)方配伍組方對方中指標(biāo)成分的藥代參數(shù)有一定影響，且黃芩苷和鹽酸小檗堿的藥動(dòng)學(xué)特征彼此差異較大。功勞去火片體內(nèi)外相關(guān)性評價(jià)

5、的試驗(yàn)結(jié)果表明其相關(guān)性良好。 一、中成藥多指標(biāo)成分提取方法和提取溶劑的研究 (一)不同提取方法對三黃片中5種葸醌類成分提取量的影響 目的：研究以乙醇、十二烷基硫酸鈉(SDS)為提取溶劑對5種葸醌類成分提取率的影響。 方法：研究了分別以乙醇回流法、乙醇超聲法、不同濃度SDS超聲提取法提取三黃片中5種葸醌類成分的提取方法，并利用HPLC法測定了其提取量。 結(jié)論：0.5％SDS水溶液SDS可以提高三黃片

6、中蒽醌的提取量。 (二)清胃黃連片4種指標(biāo)成分提取方法與提取溶劑的研究 目的：研究清胃黃連片中鹽酸小檗堿、黃芩苷、梔子苷和甘草酸4種指標(biāo)成分的最佳提取方法，為評價(jià)和控制復(fù)方中藥的質(zhì)量提供依據(jù)。 方法：通過考察清胃黃連片中4種指標(biāo)成分在不同提取方法和不同提取溶劑下的提取情況，來優(yōu)化提取體系，選擇適合清胃黃連片的提取方法。 結(jié)論：該提取體系適用于清胃黃連片多指標(biāo)成分的提取。 二、中成藥多指標(biāo)成分檢測方

7、法的研究 (一)不同廠家三黃片4種指標(biāo)成分的含量測定 目的：建立HPLC法同時(shí)測定三黃片中大黃素、大黃酚、黃芩苷、鹽酸小檗堿含量的方法，并比較了不同廠家三黃片4種指標(biāo)分的含量。 方法：采用Kromasil C<,18>色譜柱(250x4.6 mm，5.0 μm)；流動(dòng)相組成為A：甲醇-乙腈(50：50)，B：甲醇-乙腈-0.5％三乙胺水溶液(磷酸調(diào)pH3.0)梯度洗脫；檢測波長254 nm；流速1.0mL·min

8、<'-1>。 (二)同時(shí)測定清胃黃連片中4種指標(biāo)成分的含量 目的：建立反相高效液相色譜法測定清胃黃連片中梔子苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿和甘草酸4種指標(biāo)成分含量的方法。 方法：采用HypersilC<,18>色譜柱(250x4.6 mm，5.0 μm)；流動(dòng)相乙腈-0.5％三乙胺(磷酸調(diào)pH值 3.0)梯度洗脫，檢測波長為230 nm；流速1.0 mL·min<'-1>。 結(jié)論：該方法專屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠

9、，重現(xiàn)性好，可用于清胃黃連片中梔子苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿和甘草酸的含量測定，能更好的控制清胃黃連片的質(zhì)量。 (三)功勞去火片中梔子苷、黃芩苷及鹽酸小檗堿的同時(shí)測定 目的：建立反相高效液相色譜法同時(shí)測定功勞去火片中梔子苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿含量的方法。 方法：采用Kromasil C<,18> 色譜柱(250x4.6 mm，5.0 μm)；流動(dòng)相組成為A：乙腈，B：乙腈-0.5％三乙胺水溶液(磷酸調(diào)-pH3.1)(

10、10:90)梯度洗脫：流速1.0mL·min<'-1>，檢測波長254nm。 結(jié)論：該方法專屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好，可用于功勞去火片多指標(biāo)成分的含量測定，以便更好地控制功勞去火片的質(zhì)量。 三、功勞去火片體大鼠體內(nèi)外相關(guān)性的研究 (一)功勞去火片中3種指標(biāo)成分的溶出度檢查 目的：建立了以鹽酸小檗堿、黃芩苷和梔子苷為指標(biāo)成分，測定功勞去火片溶出度的方法，為評價(jià)和控制其質(zhì)量提供依據(jù)。 方法：照

11、《中國藥典》2005版(二部)溶出度測定法中的槳法，以500 mL0.5％十二烷基硫酸鈉水溶液為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速100 r·min<'-1>。取樣后，采用高效液相色譜法測定，色譜柱：Kromasil C<,18>色譜柱(250x4.6 mm，5.0 μm)，流動(dòng)相：A為乙腈；流動(dòng)相B為乙腈：0.5％三乙胺水溶液(磷酸調(diào)pH 3.1)(10：90)，梯度洗脫，檢測波長254 nm，流速1.0 mL·min<'-1>。 結(jié)論：該方法

12、準(zhǔn)確、可靠，可作為功勞去火片溶出度的測定方法，以控制中藥復(fù)方質(zhì)量。 (二)功勞去火片在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué) 目的：建立反相高效液相色譜法同時(shí)測定功勞去火片黃芩苷、鹽酸小檗堿在大鼠血漿中的濃度及其藥代動(dòng)力學(xué)行為，為臨床合理用藥提供依據(jù)。 方法：大鼠經(jīng)灌胃給藥后，血漿樣品經(jīng)甲醇沉淀蛋白進(jìn)行色譜分離，采用HPLC法測定其血漿中黃芩苷和鹽酸小檗堿的濃度。采用Kromasil C<,18>(250x4.6 mm，5.0 μ