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1、目的: 骨性關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是骨科常見的疾病。近年來伴隨世界老齡化人口的增加,OA的發(fā)病率也呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢(shì)。OA的確切病因未明,眾說紛紜,其中基質(zhì)金屬蛋白酶家族matrix metalloproteinases(MMPS)及其抑制劑家族tissue inhibitor of matrix metalloproteinases(TIMPS)與OA的關(guān)系日益受到醫(yī)學(xué)界的重視。關(guān)節(jié)軟骨的退變一直被認(rèn)為
2、是OA的標(biāo)志。目前的研究表明,骨性關(guān)節(jié)炎是關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)合成與降解失衡所致,MMPs/TIMPs比例失調(diào)是造成軟骨變性的主要原因之一。我們選擇了基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑家族中的基質(zhì)金屬蛋白酶—7(matrix metalloproteinase—7,MMP—7),基質(zhì)金屬蛋白酶—9(matrix metalloproteinase—9,MMP—9),基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物—3(tissue inhibitor of matrix
3、metalloproteinase—3,TIMP—3)應(yīng)用免疫組化法結(jié)合細(xì)胞研究它們?cè)诠切躁P(guān)節(jié)炎中滑膜的表達(dá),從而加強(qiáng)對(duì)此類患者的早期診斷和早期治療。 方法: 對(duì)60例膝關(guān)節(jié)滑膜標(biāo)本應(yīng)用SABC免疫組化法顯色基質(zhì)金屬蛋白酶MMP—7、MMP—9和其抑制劑金屬蛋白酶組織抑制物TIMP—3在病變組和正常組的表達(dá),并用HE染色法觀察細(xì)胞形態(tài)。 一、臨床資料 增生及病變滑膜來自2007年11月16日至2008年1
4、0月11日期間于我科住院手術(shù)治療的患者,所有病例均經(jīng)本院骨科和影像檢查確診。其中OA患者共計(jì)30例,為病變組,年齡在48~75歲之間,行關(guān)節(jié)鏡下探查清理術(shù),術(shù)中留取關(guān)節(jié)滑膜。對(duì)照組為非OA組,亦為三十例。其中滑膜皺壁綜合癥4例,半月板損傷20例,前后交叉韌帶損傷6例,術(shù)中取關(guān)節(jié)鏡入路清理之滑膜。 二、研究方法 術(shù)后1h內(nèi),關(guān)節(jié)滑膜用生理鹽水沖洗,切成1.0 cm×0.8 cm×0.5 cm小塊。用10%中性多聚甲醛固定,
5、常規(guī)石蠟包埋,5μm切片。其中病變組和對(duì)照組各隨機(jī)抽取兩例滑膜行HE染色,光鏡下觀察關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞的組織形態(tài)。其余切片行免疫組化SABC法染色,顯微鏡下觀察染色切片,并用目鏡網(wǎng)格測(cè)微尺任選10個(gè)視野(400X),每個(gè)視野下進(jìn)行100個(gè)細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù),以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。 結(jié)果: 基質(zhì)金屬蛋白酶MMP—7、MMP—9和其抑制劑金屬蛋白酶組織抑制物TIMP—3的表達(dá)在正常關(guān)節(jié)滑膜與在重度骨性關(guān)節(jié)炎患者膝關(guān)節(jié)滑膜中的表達(dá)有
6、顯著差異(p<0.05)。 一、組織學(xué)結(jié)果 結(jié)果顯示,正常關(guān)節(jié)滑膜組織無慢性炎癥表現(xiàn),滑膜細(xì)胞分布較規(guī)則,無明顯增生,毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)及周圍組織無明顯病理改變,而OA膝關(guān)節(jié)滑膜呈慢性炎癥反應(yīng),有大量的淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn),并且圍繞血管分布,滑膜細(xì)胞增生,呈局灶行乳頭狀或絨毛狀增生,毛細(xì)血管增生明顯,單層血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹,小血管腔變窄,周圍血管纖維化及深部纖維化,絨毛,局灶性和圍血管性玻璃樣變,間質(zhì)玻璃樣變,軟骨化生。
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