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1、螺旋藻藻膽蛋白由藻藍(lán)蛋白和別藻藍(lán)蛋白組成,它們是重要的活性物質(zhì),在臨床、光合作用原初反應(yīng)機(jī)理的探索和熒光分子探針制備等方面有重要意義?,F(xiàn)成螺旋藻藻膽蛋白及其成份的提取純化技術(shù)中,柱層析材料一般采用價(jià)格昂貴的進(jìn)口材料,造成生產(chǎn)成本過(guò)高,以致價(jià)格因素成為它們開(kāi)發(fā)利用的瓶頸。本課題以鈍頂螺旋藻為藻膽蛋白的來(lái)源,以吸附性能良好的硅藻土和殼聚糖作為研究對(duì)象,對(duì)藻膽蛋白的粗提工藝和藻藍(lán)蛋白柱層析純化過(guò)程、及產(chǎn)品性質(zhì)進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究。其主要內(nèi)容和結(jié)
2、論如下: 分析了鈍頂螺旋藻的部分生物學(xué)特征以及主要成分,測(cè)得鈍頂螺旋中藻葉綠素占藻粉重量的19.05%,藻膽蛋白占藻粉重量的8.92%。 研究了在藻膽蛋白粗提工藝過(guò)程中凍融次數(shù)和超聲時(shí)間兩個(gè)主要粗提參數(shù)對(duì)藻膽蛋白的提取純度和提取率的影響。對(duì)于鹽析前的粗提液,凍融破碎兩次比凍融破碎三次所得的藻膽蛋白純度高,鹽析后相反,藻膽蛋白純度隨著破碎時(shí)間增大略有減小。而藻膽蛋白的提取率,無(wú)論鹽析前后,凍融破碎三次比凍融破碎二次所得到的
3、藻膽蛋白提取率高,提取率隨著破碎時(shí)間增大而增大。若單純考慮藻膽蛋白粗提液藻膽蛋白的純度,細(xì)胞破碎最佳條件為:凍融三次,超聲0min;若單純考慮提取率,最佳條件為:凍融三次,超聲12min。 對(duì)硅藻土和殼聚糖作為柱層析材料純化藻藍(lán)蛋白的性能進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:硅藻土層析過(guò)程符合吸附層析理論,在兩種型號(hào)硅藻土純化藻藍(lán)蛋白的對(duì)比實(shí)驗(yàn)中,070<'[#]>硅藻土因滲透率和吸附力強(qiáng)于030<'[#]>,其純化性能更優(yōu)。在070<'[#]
4、>硅藻土的橫向?qū)嶒?yàn)中,洗脫液的離子強(qiáng)度對(duì)洗脫效果的影響顯著, 其中純化效果: 0.02mol/L>0.05mol/L>0.01mol/L。在三種粒徑的殼聚糖純化藻藍(lán)蛋白的對(duì)比實(shí)驗(yàn)中,層析過(guò)程符合離子交換層析理論,粒徑30-75 μm的殼聚糖柱層析純化性能最佳。藻藍(lán)蛋白粗提液經(jīng)硅藻土層析分離后,純度(A<,620>/A<,280>)達(dá)到1.75,可應(yīng)用于食品、化妝品、保健品等領(lǐng)域,也可以作為下一步純化的預(yù)處理。相比硅藻土,殼聚糖
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