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文檔簡介
1、研究背景:
頭發(fā)是頭面部特征的一個重要組成部分,它不但能參與勾勒一個人的臉型,而且能夠影響到一個人的外表年齡,它的缺失會給患者帶來極大的精神壓力。隨著生活水平的提高,人們對脫發(fā)的診治要求日益迫切,現(xiàn)代醫(yī)學也越來越重視對脫發(fā)的研究。在治療禿發(fā)時,毛發(fā)移植術有著“一勞永逸”的優(yōu)點,但其同時也存在著外形不自然和成活率較低的缺點。
雖然毛囊單位移植已成為毛發(fā)移植的金標準,然而由于毛囊單位極小,同其它移植物比如微小毛胚
2、相比顯得比較脆弱,因此在分離毛囊移植物過程中也就存在其易損傷性的問題。國內(nèi)外許多學者已經(jīng)比較深入的研究了在毛發(fā)移植過程中,有哪些因素能夠影響毛囊單位移植后成活率的問題。然而,目前各個研究單位及醫(yī)院對毛囊單位移植物的具體成活率尚未形成一致看法,主要是由于影響毛囊單位移植成活率的因素很多。毛囊單位在分離過程中的切割、擠壓、干燥、存儲條件等都會影響其移植后的成活率,甚至Fan和Kohn等認為局麻藥中加的副腎素對毛囊單位的存活率也有影響。Gre
3、co等提出毛發(fā)移植術后成移植物的存活率低的因為主要是醫(yī)源性因素造成的,也即是人為因素。然而,Gandelman等提出在毛囊單位的分離過程中,對其適當?shù)臄D壓、彎曲不會影響其成活率,可是他卻沒有對毛囊移植物的大小進行描述,同時其實驗還存在著樣本量小的問題,不能充分的支持其結論。Seager等通過對比試驗提出:毛囊周圍如果留有較多保護組織的話可以提高其移植后的成活率,后來也被Michael證實,但是他們的研究結論還是有爭議的,同時,他們的試驗
4、均沒有給出一個關于毛囊移植物具體大小的定量標準。
目前存在的問題:
1.毛囊單位修剪的大小不僅影響著其移植后的成活率,還與毛發(fā)移植密度密切相關。相關文獻關于修剪毛囊大小只是說保留真皮,皮脂腺等周圍組織,但具體毛囊外根鞘周圍保留多少厚度至今尚未有一個定量標準。尤其對于國內(nèi)而言,還未有關于毛囊修剪大小與其成活率關系的研究。
2.在毛發(fā)移植過程中,對毛囊單位的分離及種植過程中很難避免用移植器械夾持毛囊
5、單位,但是,在力度和時間恒定的條件下,移植器械對毛囊單位夾持部位的不同對移植物成活率所產(chǎn)生的影響尚不清楚,至今尚未有關于這方面的研究。
研究目的與意義:
基于上述問題我們設計了本研究,本實驗主要是模仿臨床毛發(fā)移植過程,通過在體外對毛囊單位移植物施加不同的處理,包括將毛囊單位修剪成不同大小的移植物和用毛發(fā)移植專用器械對毛囊單位的不同部位進行定量的擠壓,然后通過器官培養(yǎng)來觀察這些處理因素對毛囊生長的影響。通過實驗
6、提供的具體數(shù)據(jù),可以為臨床毛發(fā)移植提供一個相對準確的量化標準,以便提高臨床中毛發(fā)移植的成活率,增加移植密度,同時也降低移植難度,以便于中小醫(yī)院在臨床推廣應用毛囊單位移植技術。
研究內(nèi)容:
1.毛囊單位在體外被修剪成不同大小的移植物,根據(jù)其外根鞘保留的結締組織厚度進行分組,然后體外行器官培養(yǎng),6天后通過光鏡下觀察其大體形態(tài)學變化,HE染色后光鏡下觀察其組織學變化,同時計算毛囊單位的生長率和毛干的生長長度,根據(jù)上
7、述檢測指標判斷毛囊單位的大小對其生長的影響。
2.基于上一實驗結果,用毛發(fā)移植專用鑷子分別夾持毛囊單位移植物的毛球部(A組)和隆突部(B組)10秒鐘,C組是對照組,然后行體外器官培養(yǎng),6天后通過光鏡下觀察其大體形態(tài)學變化,HE染色后光鏡下觀察其組織學變化;計算毛囊單位的生長率和毛干的生長長度,根據(jù)上述檢測指標判斷受力部位的不同對毛囊單位生長的影響。
材料和方法:
1.標本的來源及制備 標本取自臨
8、床毛發(fā)移植患者捐獻的全厚頭皮,標本離體后立即放入盛有0℃生理鹽水的無菌培養(yǎng)皿中。在超凈工作臺內(nèi),消毒標本并用0℃生理鹽水反復沖洗后,順毛干方向將頭皮切成寬0.3~0.5 cm寬的小頭皮條,并將其置于0℃生理鹽水中。參照Limmer法,用11號尖刀片在10~20倍體視鏡下將其分離成單個毛囊。分離完成后用眼科剪將長出于表皮的毛干剪去,以便于測量毛干生長的長度,整個過程完全模擬臨床手術。為了保證實驗的均衡性,從分離所得的毛囊中,按照一定的納入
9、和排除標準挑選符合要求的毛囊納入實驗。
2.實驗分組 ①將分離所得到的毛囊依據(jù)毛囊外根鞘周圍保留的保護組織厚度進行分組,以0.3mm為一個標準單位(該數(shù)值可以通過11號手術刀片刀背厚度估量)隨機分為A、B、C組,各組的保護組織厚度分別為0mm、0.3mm和0.6 mm;②在上個實驗基礎上,將分離好的毛囊單位隨機分為A、B、C三組,然后分別用毛發(fā)移植專用鑷子在時間和力度恒定條件下分別夾持其毛乳頭(A組)、隆突部(B組),C組
10、為不做任何處理的對照組。
3.檢測指標 將分離所得毛囊單位分批分組的進行器官培養(yǎng),每天用倒置顯微鏡觀察毛囊的形態(tài)學變化,器官培養(yǎng)6天后從各組中隨機挑選部分毛囊進行HE染色行組織學觀察,并分別計數(shù)各組毛囊單位中的毛干生長率,測量毛干生長長度,
4.統(tǒng)計學分析
應用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進行數(shù)據(jù)處理。行×列表資料采用x2檢驗;多組均數(shù)比較時如方差齊性,采用單因素方差分析(one-way ANO
11、VA)及Bonferroni兩兩比較;多組均數(shù)比較如方差不齊,采用Welch近似方差分析及Dunnett’s T3兩兩比較。整理后數(shù)據(jù)均以(x)±S表示,所有統(tǒng)計分析中,檢驗水準α=0.05。
結果:
1.器官培養(yǎng)的6天后,各組毛囊單位的形態(tài)均無明顯改變;HE染色后在普通光學顯微鏡下可清晰觀察到三組毛囊組織學無明顯變化;A、B、C三組毛干的生長率分別為81.5%、91.7%、92.6%,三組間的差異具有統(tǒng)計學
12、意義(x2=8.116,P=0.017),A組毛干生長率低于B、C組;在有毛干生長的毛囊中,三組毛干的平均生長長度分別為(1.24±0.10)、(1.36±0.10)、(1.36±0.12)mm,三組毛干平均生長長度間的差異具有統(tǒng)計學意義(F=38.259,P=0.000),A組和B組的差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.000),A組和C組間的差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.000),B組和C組間的差異無統(tǒng)計學意義(P=0.969)A組毛干的平均
13、生長長度小于B、C組毛干的平均生長長度。
2.器官培養(yǎng)的6天后,倒置顯微鏡下觀察到三組毛囊的生長均主要表現(xiàn)為毛干的延長,內(nèi)根鞘和外根鞘變化不明顯,真皮鞘則無明顯變化;HE染色后在普通光學顯微鏡下可清晰觀察到三組毛囊組織學無明顯變化;A、B和C三組毛干的生長速度以第1、2天最快,以后逐日降低,但是A組的生長速度要低于B和C組。A、B、C三組毛囊中毛干的生長率分別為75.6%、90.0%、92.2%,三組間的差異具有統(tǒng)計學意義
14、(x2=12.189,P=0.002),A組毛干生長率低于B、C組;在有毛干生長的毛囊中,三組毛干的平均生長長度分別為(1.11±0.11)、(1.26±0.09)和(1.29±0.10)mm,三組間的差異具有統(tǒng)計學意義(F=62.692,P=0.000),A組和B組的差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.000),A組和C組間的差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.000),B組和C組間的差異無統(tǒng)計學意義(P=0.101)。
結論:
15、 1.我們是首個以定量的方式來探討毛囊修剪大小對其生長的影響的實驗研究。我們的結果證實:毛囊如果完全裸露會影響其活性,其毛干的生長率和生長長度會明顯降低;雖然本實驗結論不知是否在體內(nèi)依然適用,但就體外實驗而言,毛囊的外根鞘周圍留有0.3mm厚度的保護組織就可以保證其成活率;同時,又可以增加單次的移植密度。由于0.3 mm的厚度很薄,因此該厚度不適合在裸視下去分離毛囊。
2.我們的實驗是首個以定位和定量的方式探討,在恒
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