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文檔簡介
1、目的:研究百草枯誘導(dǎo)急性肺損傷中毒機(jī)制中胞內(nèi)鈣離子的作用，并探討鈉氫交換體-1（NHE-1）、鈉通道阻滯劑鹽酸阿米洛利對百草枯中毒誘導(dǎo)的急性肺損傷的保護(hù)及治療作用。
方法:體外培養(yǎng)A549細(xì)胞，用不同濃度百草枯進(jìn)行不同時間的干預(yù)，MTT 法檢測半數(shù)成活率以篩選半數(shù)死亡時間和半數(shù)死亡濃度作為實驗干預(yù)點，并以此干預(yù)點構(gòu)建細(xì)胞百草枯中毒模型，根據(jù)不同藥物處理分為3個實驗組:空白對照組、百草枯損傷組和鹽酸阿米洛利保護(hù)組。利用實時定
2、量PCR技術(shù)分析各實驗組NHE-1mRNA表達(dá)水平變化；用熒光染料Fluo-3/AM 染色，利用激光掃描共聚焦顯微鏡的實時監(jiān)測胞內(nèi)鈣離子的優(yōu)勢，記錄給予百草枯刺激和鹽酸阿米洛利保護(hù)時的胞內(nèi)游離鈣離子濃度變化。數(shù)據(jù)采用（─X±S）表示，應(yīng)用SPSS16.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。
結(jié)果:實時定量PCR結(jié)果顯示NHE-1mRNA表達(dá)水平在藥物對照組明顯比百草枯組和空白對照組低（P<0.05）。當(dāng)給予百草枯刺激時，胞內(nèi)游離鈣離子濃度
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