飛龍掌血抗炎鎮(zhèn)痛、抗RA活性研究.pdf

1、研究背景:飛龍掌血[ToddaliaasiaticaLam.],其根或根皮在湖北恩施等地區(qū)長(zhǎng)期被民間用于治療跌打損傷、腰腿疼痛、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肋間神經(jīng)痛等,且療效顯著,具有活血化瘀的功效。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis,RA)是一種以關(guān)節(jié)及關(guān)節(jié)周?chē)M織的非感染性炎癥為主的全身性自身免疫性疾病,其病理特點(diǎn)為關(guān)節(jié)滑膜的慢性炎癥,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),血管翳形成,軟骨及骨組織的破壞,以及關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的破壞與功能的喪失。RA目前仍是

2、一種難以治愈的疾病,誤診率和不合理用藥率較高,且西醫(yī)尚無(wú)特異有效的根治本病的療法或藥物,今年來(lái)中醫(yī)藥治療本病以其具有調(diào)節(jié)整體功能、療效穩(wěn)定、副作用小的特點(diǎn),日益被人們所關(guān)注。
　　研究目的:為了證實(shí)飛龍掌血的藥理作用以進(jìn)一步擴(kuò)大使用,且為了篩選飛龍掌血抗炎鎮(zhèn)痛及抗RA活性部位以進(jìn)一步開(kāi)發(fā)新藥,本研究對(duì)產(chǎn)于湖北恩施自治州的飛龍掌血根皮[Radix Toddaliae Asiaticae]進(jìn)行了系統(tǒng)的基礎(chǔ)藥理研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體內(nèi)整體動(dòng)

3、物模型的建立對(duì)飛龍掌血乙醇提取物及各部位浸膏的鎮(zhèn)痛、抗炎及抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的活性進(jìn)行了系統(tǒng)的評(píng)價(jià)。同時(shí)對(duì)飛龍掌血抑制II型膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎(typeII collagen-induced arthritis,CIA)的作用機(jī)制進(jìn)行了更深入的研究:考察其對(duì)于小鼠外周血清中促炎性細(xì)胞因子TNF-α(tumour necrosis factoralpha)、IL-1β(inter leukin-1beta)、IL-6(inter leuk

4、in-6)的調(diào)控作用及對(duì)于抑炎性細(xì)胞因子IL-10(inter leukin-10)的調(diào)控作用,研究給藥組、模型對(duì)照組與正常對(duì)照組三者之間是否有顯著性差異及相關(guān)性,從而探討這些細(xì)胞因子在CIA發(fā)病過(guò)程中的作用,以更深入了解RA的發(fā)病機(jī)制。
　　研究方法:1)實(shí)驗(yàn)采用小鼠醋酸扭體動(dòng)物模型對(duì)飛龍掌血乙醇提取物及各部位浸膏進(jìn)行了鎮(zhèn)痛活性評(píng)價(jià)及活性部位篩選;2)實(shí)驗(yàn)采用二甲苯致小鼠耳腫脹動(dòng)物模型對(duì)飛龍掌血乙醇提取物及各部位浸膏進(jìn)行了抗急性

5、炎癥活性評(píng)價(jià)及活性部位篩選;3)實(shí)驗(yàn)采用牛II型膠原誘導(dǎo)性小鼠關(guān)節(jié)炎(typeII collagen-induced arthritis,CIA)動(dòng)物模型對(duì)飛龍掌血乙醇提取物及各部位浸膏進(jìn)行了抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)活性評(píng)價(jià)及活性部位篩選,并通過(guò)ELISA測(cè)定細(xì)胞因子方法對(duì)該藥材抗RA的作用機(jī)制進(jìn)行了探討。
　　研究結(jié)果:1)在醋酸致小鼠扭體反應(yīng)疼痛模型中,飛龍掌血乙醇總膏及其乙酸乙酯部位、生物堿部位浸膏有一定的鎮(zhèn)痛作用,且基本呈

6、劑量依賴關(guān)系,其中飛龍掌血乙醇總膏及其乙酸乙酯部位浸膏抗炎作用較明顯,高中劑量均與模型對(duì)照組有顯著性差異(P<0.05);2)在二甲苯致小鼠耳腫脹炎癥模型中,飛龍掌血乙醇總膏及其乙酸乙酯部位浸膏均有一定的抗炎作用,且基本呈劑量依賴關(guān)系,其中飛龍掌血乙醇總膏及其乙酸乙酯部位浸膏抗炎作用較明顯,高中劑量均與模型對(duì)照組有顯著性差異(P<0.05)。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們得出飛龍掌血乙醇總提取物具有有效的抗炎鎮(zhèn)痛活性,且其乙酸乙酯部位活性較其它部位更為

7、顯著,可初步確定其有效活性部位為乙酸乙酯部位;3)本研究建立了RA的一種常見(jiàn)的整體動(dòng)物病理研究模型:牛II型膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎模型(CIA)。觀察了飛龍掌血甲醇總膏及其各萃取部位對(duì)CIA小鼠的關(guān)節(jié)炎發(fā)展的抑制作用,評(píng)價(jià)其是否能有效降低小鼠外周血清中不同細(xì)胞因子水平,據(jù)此證實(shí)了飛龍掌血具有明顯的抗RA作用,并確定活性部位,與我們前期研究的抗炎鎮(zhèn)痛的活性部位基本一致,且證實(shí)飛龍掌血及其活性部位可以抑制CIA小鼠免疫器官重量,可以明顯下調(diào)C