亞硫酸鹽對(duì)培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元胞內(nèi)鈣的作用及機(jī)制.pdf

1、文章從以下兩部分就亞硫酸鹽對(duì)培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元胞內(nèi)鈣的作用及機(jī)制進(jìn)行了綜述。
　　第一部分亞硫酸鹽對(duì)培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元胞內(nèi)鈣的作用
　　目的:亞硫酸鹽是生物體內(nèi)重要的氧化代謝產(chǎn)物,體內(nèi)很多含硫活性物質(zhì),如硫化氫,半胱氨酸等,都可被氧化生成亞硫酸鹽。生理情況下,體內(nèi)存在的亞硫酸鹽氧化酶,能將亞硫酸通過線粒體及時(shí)地轉(zhuǎn)化為硫酸鹽;病理情況下,如缺血缺氧,會(huì)發(fā)生亞硫酸鹽的累積。體內(nèi)過多的亞硫酸鹽會(huì)對(duì)機(jī)體造成嚴(yán)重?fù)p傷。本部分實(shí)驗(yàn)考察了

2、亞硫酸鹽對(duì)皮層神經(jīng)元胞內(nèi)鈣信號(hào)的影響,探討其對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的毒性作用。
　　方法:大鼠原代皮層神經(jīng)元培養(yǎng),采用熒光鈣離子成像技術(shù)檢測(cè)亞硫酸鹽對(duì)皮層神經(jīng)元胞內(nèi)游離鈣離子濃度(intracellular free calcium contration,[Ca2+]i)的影響。
　　結(jié)果:在250μM-1 mM的濃度范圍內(nèi),亞硫酸鹽劑量依賴性的增加皮層神經(jīng)元[Ca2+]i。這種增加是持續(xù)性的,不能回到基礎(chǔ)值。
　　結(jié)論:亞硫酸鹽

3、可引起持續(xù)性的“鈣超載”,使培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元胞內(nèi)鈣信號(hào)的紊亂。
　　第二部分亞硫酸鹽增加培養(yǎng)大鼠皮層神經(jīng)元胞內(nèi)鈣的機(jī)制
　　目的:本部分實(shí)驗(yàn)考察亞硫酸鹽如何升高皮層神經(jīng)元胞內(nèi)游離鈣離子濃度,對(duì)鈣來源和相應(yīng)的信號(hào)通路進(jìn)行探討。
　　方法:培養(yǎng)原代皮層神經(jīng)元,采用熒光鈣離子成像技術(shù)檢測(cè)亞硫酸鹽對(duì)皮層神經(jīng)元胞內(nèi)游離鈣離子濃度(intracellular free calcium contration,[Ca2+]i)的影響

4、。
　　結(jié)果:在無鈣外液條件下,亞硫酸鹽的升鈣作用被基本抑制。內(nèi)質(zhì)網(wǎng) Ca2+-ATPase特異性抑制劑CPA和TG能基本抑制亞硫酸鹽的升鈣作用。提示胞內(nèi)鈣和胞外鈣都參與了其升鈣作用。具有清除胞內(nèi)ROS作用的抗氧化劑Trolox和還原劑DTT均能大部分抑制亞硫酸鹽的升鈣作用,說明其升鈣作用和胞內(nèi)活性氧升高密切相關(guān)。AC抑制劑SQ22536、PKA抑制劑H89、NOS抑制劑ADMA和GC抑制劑ODQ卻不能抑制亞硫酸鹽的升鈣作用。PL