鼻咽癌患者EB病毒潛伏感染和外周血T淋巴細(xì)胞及癌組織中IL-21蛋白表達(dá)變化的臨床意義.pdf

1、目的：研究放療前、后鼻咽癌患者及EBV-VCA-IgA陽性和EBV-VCA-IgA陰性者外周血T淋巴細(xì)胞亞群含量及血漿游離EBV-DNA載量變化的臨床意義，研究鼻咽癌及鼻咽黏膜慢性炎組織中EBER及IL-21蛋白的表達(dá)及意義，初步探討EBV潛伏感染與鼻咽癌患者鼻咽部微環(huán)境和外周血細(xì)胞免疫狀態(tài)的關(guān)系，為揭示鼻咽癌發(fā)生發(fā)展過程中EBV潛伏感染引起機(jī)體免疫逃逸的可能機(jī)制提供依據(jù)。
　　 方法：⑴流式細(xì)胞術(shù)檢測29例放療前和34例放療后

2、鼻咽癌患者，7例血漿EBV-VCA-IgA陽性和28例血漿EBV-VCA-IgA陰性者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD25+T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)。熒光實(shí)時定量PCR檢測上述樣本血漿游離EBV-DNA載量。⑵采用原位雜交和免疫組化方法檢測52例鼻咽癌、15例鼻咽黏膜慢性炎中EBER和IL-21蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：①外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果:鼻咽癌放療前組CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值均低于

3、鼻咽癌放療后組及EBV-VCA-IgA陽性組和陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);放療前組CD8+T淋巴細(xì)胞百分率明顯高于其他3組，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);放療前組或放療后組的CD25+T淋巴細(xì)胞百分率均高于EBV-VCA-IgA陽性組及陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞百分率隨鼻咽癌臨床TNM分期進(jìn)展呈遞減趨勢，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);CD25+T淋巴細(xì)

4、胞百分率呈遞增趨勢，Ⅰ+Ⅱ期與Ⅳ期比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。②血漿游離EBV-DNA拷貝數(shù)檢測結(jié)果:鼻咽癌放療前組血漿游離EBV-DNA拷貝數(shù)均高于放療后組、EBV-VCA-IgA陽性組和陰性組，組間差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);放療前Ⅲ期、Ⅳ期組的血漿游離EBV-DNA拷貝數(shù)明顯高于Ⅰ+Ⅱ期組，組間差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);放療前Ⅳ期組的血漿EBV-DNA拷貝數(shù)高于Ⅲ期組，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0

5、.05)。③原位雜交和免疫組化檢測結(jié)果:EBER和IL-21蛋白在52例鼻咽癌原發(fā)灶中的表達(dá)陽性率分別為92.3％(48/52)和73.2％(38/52)，在15例鼻咽黏膜慢性炎組織中的陽性表達(dá)率均為0％(0/15)，組間差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);52例鼻咽癌組織中，EBER在各臨床參數(shù)組中均高表達(dá)，組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05); IL-21蛋白陽性表達(dá)率在臨床TNM分期Ⅰ+Ⅱ期組為92.3％（24/26），高于

6、Ⅲ+Ⅳ期組53.8％(14/26)的陽性表達(dá)率(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：⑴鼻咽癌患者放療前組外周血CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞和CD4+/CD8+比值低于鼻咽癌放療后組、EBV-VCA-IgA陽性組和陰性組，而CD8+T淋巴細(xì)胞明顯高于其他3組;放療前組或放療后組的CD25+T淋巴細(xì)胞百分率均高于EBV-VCA-IgA陽性組及陰性組;放療前組血漿游離EBV-DNA拷貝數(shù)均高于其他3組。隨著鼻咽癌臨床TNM分期進(jìn)展，CD3+

7、、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞百分率呈遞減趨勢，CD25+T淋巴細(xì)胞百分率呈遞增趨勢，血漿游離EBV-DNA拷貝數(shù)明顯增高。提示EBV潛伏感染可能引起鼻咽癌患者機(jī)體T淋巴細(xì)胞功能異常，并因此促進(jìn)了鼻咽癌的進(jìn)展。⑵監(jiān)測鼻咽癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及血漿游離EBV-DNA拷貝數(shù)變化情況，既可以用于鼻咽癌血清學(xué)輔助診斷，又可以作為監(jiān)控放療療效的重要指標(biāo)。⑶鼻咽癌原發(fā)灶中EBER、IL-21蛋白高表達(dá)，IL-21蛋白陽性表達(dá)率隨著鼻咽癌臨床T