培美曲塞對人結(jié)腸癌HT29細(xì)胞的抑制效應(yīng)及對P21WAFI表達(dá)的影響.pdf

1、背景和目的:
　　結(jié)直腸癌在我國各地區(qū)的發(fā)病率居高不下。近期研究顯示P21WAFI與結(jié)直腸癌的發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān),同時培美曲塞在多種腫瘤中通過上調(diào)P21WAFI產(chǎn)生抗腫瘤作用的研究也先后問世。本研究中培美曲塞不同藥物濃度及時間分別作用于人結(jié)腸腺癌細(xì)胞HT29后,檢測P21WAFI表達(dá)以及該表達(dá)對HT29增殖和凋亡的影響。
　　方法:
　　1、RT-PCR、Western blot檢測培美曲塞及5-FU即陽性對照組

2、不同藥物濃度及時間分別作用于HT29后P21WAFI的表達(dá)情況。篩選出兩種藥物最佳濃度及作用時間。
　　2、通過MTT比色法,流式細(xì)胞技術(shù)比較兩種藥物在最佳濃度及作用時間對HT29細(xì)胞生物學(xué)活性的影響。
　　結(jié)果:
　　1、RT-PCR、Western blot提示培美曲塞及5-FU最佳濃度及作用時間均為1000μmol/L、48h。
　　2、最適條件下培美曲塞(1000μmol/L,作用48h)和5-FU(10

3、00μmol/L,作用48h)組中的P21WAFI在RT-PCR中的結(jié)果分別是0.93±0.19、0.85±0.15, P<0.05;在Western blot中的結(jié)果分別是1.59±0.13、1.31±0.14,P<0.05。
　　3、MTT比色法中培美曲塞(1000μmol/L,作用48h)及5-FU(1000μmol/L,作用48h)組中的OD值分別為0.14±0.07,、0.21±0.06,P<0.05均明顯低于空白對照組

4、0.51±0.11.流式細(xì)胞技術(shù)檢測凋亡,培美曲塞(1000μmol/L,作用48h)的凋亡率是37.03％,5-FU(1000μmol/L,作用48h)的凋亡率是14.02%,P<0.05,均明顯高于空白對照組5.03%。
　　結(jié)論:
　　1、培美曲塞、5-FU對HT29細(xì)胞增殖抑制作用及凋亡促進(jìn)作用可能與P21WAFI上調(diào)有關(guān)。
　　2、相同藥物濃度及作用時間時,培美曲塞對HT29細(xì)胞增殖抑制作用和凋亡促進(jìn)作用更明