Urotensin Ⅱ在CCI大鼠脊髓背角的表達及其對正常大鼠痛覺的影響.pdf

1、目的：觀察UrotensinⅡ及其受體GPR14在CCI大鼠脊髓背角的表達變化情況，以及不同途徑的UrotensinⅡ給藥對正常大鼠痛行為學的影響。
　　方法：通過坐骨神經松扎制備大鼠CCI神經病理性疼痛模型;用熱輻射法測定熱痛覺過敏;用機械刺激縮足法測定機械痛覺過敏;應用RT-PCR法檢測脊髓UⅡ和GPR14 mRNA的表達;應用免疫熒光技術檢測脊髓背角UⅡ和GPR14的表達;應用Western blot技術檢測脊髓UⅡ、GPR

2、14、p-p38和NF-κB的表達;ELISA法檢測脊髓勻漿液中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。
　　結果：CCI大鼠熱縮足潛伏期顯著縮短，機械刺激縮足反射閾值顯著下降;RT-PCR和Western blot結果表明UⅡ和GPR14 mRNA和蛋白在CCI大鼠脊髓的表達顯著增強;免疫熒光雙標結果顯示UⅡ和GPR14主要表達在脊髓背角神經元和星形膠質細胞內，而小膠質細胞未見明顯表達。足底注射和坐骨神經周圍注射不同劑量的UⅡ并

3、未顯著改變大鼠的痛覺行為學結果。而正常大鼠鞘內給予5μgUⅡ后引起顯著的機械痛敏和熱痛敏，在3小時達到高峰，在12小時回到基線水平;同時大鼠脊髓P38的磷酸化水平和NF-κB的活化程度顯著增強;IL-1β、IL-6和TNF-α的水平也顯著升高。而鞘內給予UⅡ受體拮抗劑或P38抑制劑能夠顯著改善UⅡ誘導的大鼠痛覺敏化，同時顯著抑制了UⅡ引起的大鼠脊髓背角P38的磷酸化和NF-κB的活化，降低了UⅡ誘導的IL-1β、IL-6和TNF-α的產