腸缺血再灌注時(shí)P-選擇素表達(dá)與NAC對(duì)腸損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:腸缺血再灌注損傷是外科常見的一種損傷,它的病理過程有多種因素參與共同作用,但確切的病理生理機(jī)制仍尚不清楚.該實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠腸缺血再灌注模型,利用免疫組織化學(xué)及反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR法)來觀察腸P-選擇素和P-選擇素mRNA(Ps mRN)的表達(dá)及腸ICAM-1的表達(dá),同時(shí)測(cè)定髓過氧化物酶(Myeloperoxidase MPO)、二胺氧化酶(Diamine oxidase DAO)等相關(guān)指標(biāo),應(yīng)用N-乙酰半胱氨酸(

2、N-acetylcysteine NAC)抗再灌注損傷治療,研究目的在于了解P-選擇素及ICAM-1在腸缺血再灌注損傷過程中的表達(dá)與NAC抗損傷治療的關(guān)系及其作機(jī)制.方法:采用48只雄性Sprague-Dawley(SD)幼年大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn).通過用無損傷血管夾夾閉阻斷腸系膜上動(dòng)脈血運(yùn)40分鐘造成腸缺血,然后松夾建立缺血再灌注模型.48只大鼠隨機(jī)分成8組,每組6只.G1:假手術(shù)組;G2:缺血40min/再灌注30min;G3:缺血40min

3、再灌注60min;G4:缺血40min/再灌注240min.G5組:缺血40min/再灌注30min;缺血時(shí)給予NAC;G6組:缺血40min/再灌注30min;再灌注時(shí)給予NAC;G7組:缺血40min/再灌注60min;再灌注30min時(shí)給予NAC;G8組:缺血40min/再灌注240min,再灌注120min時(shí)給予NAC.治療組用NAC干預(yù)治療通過大鼠的股靜脈穿刺給藥,NAC劑量為150mg/kg.測(cè)定不同時(shí)間段缺血再灌注各組在腸

4、P-選擇素和Ps mRNA的表達(dá)及ICAM-1的表達(dá);檢測(cè)血及腸組織二胺氧化酶的活性反映腸粘膜損傷程度,血及組織髓過氧化物酶的活性反映白細(xì)胞聚集和浸潤(rùn)程度;光鏡和電鏡觀察腸組織形態(tài)學(xué)變化及判斷損傷程度.結(jié)論1.腸缺血再灌注可導(dǎo)致P-選擇素、ICAM-1表達(dá)上調(diào),它們可能是參與腸缺血再灌注腸損傷的重要因素.2.DAO活性變化能反映小腸粘膜功能受損和修復(fù)狀況,可作為一種觀察腸損傷程度的指標(biāo).3.再灌注早期應(yīng)用NAC可抑制缺血再灌注腸組織P-