木霉菌REMI轉(zhuǎn)化子誘導黃瓜抗白粉病方法與機理的研究.pdf

1、本文開展了木霉菌REMI轉(zhuǎn)化子誘導黃瓜抗白粉病方法與機理的研究，結(jié)果如下： 1.篩選出了對黃瓜白粉病具有誘導抗性作用的木霉菌轉(zhuǎn)化子3株。本文利用木霉菌出發(fā)菌株T23及其300余株REMI轉(zhuǎn)化子的發(fā)酵液處理黃瓜幼苗的根部，隨后挑戰(zhàn)接種白粉病菌，調(diào)查病情指數(shù)。結(jié)果表明轉(zhuǎn)化子F3對白粉菌的防效最高，達到66.7％，且發(fā)現(xiàn)經(jīng)轉(zhuǎn)化子F3發(fā)酵液處理后黃瓜葉片防御酶PAL、PPO、CAT、POD、SOD活性以及蛋白含量與對照相比均有顯著變化。

2、 2.初步研究了轉(zhuǎn)化子F3發(fā)酵液的活性成分。采用透析和濃縮的方法，將發(fā)酵液分為蛋白組分和非蛋白組分，分別處理黃瓜幼苗根部，結(jié)果表明原始發(fā)酵液具有較好的誘導抗病效果，而發(fā)酵液中的蛋白和非蛋白組分分別處理黃瓜幼苗時則不產(chǎn)生誘導抗病效果，同時將蛋白和非蛋白組分再次混合仍可以產(chǎn)生防病效果。以上結(jié)果證明F3發(fā)酵液中誘導黃瓜抗白粉病的物質(zhì)是蛋白和所有非蛋白成分共同作用的結(jié)果，而不是其中單一組分的作用。在此基礎(chǔ)上，研制了一種以木霉菌發(fā)酵液為主

3、要組分的誘抗型種衣劑。該種衣劑可有效控制黃瓜白粉病發(fā)生，防效最高達到74％。 3.首次利用植物蛋白質(zhì)組學技術(shù)，研究了木霉菌及REMI轉(zhuǎn)化子誘導黃瓜抗白粉病的機理。本研究建立了蛋白質(zhì)提取和雙向電泳分離技術(shù)。通過雙向電泳及相應的分析軟件(PDQuest<'TM> 2-D software)可將不同處理的幼苗葉片蛋白進行分離。結(jié)果發(fā)現(xiàn)種衣劑處理的葉片產(chǎn)生22種上游調(diào)控蛋白和7種下游調(diào)控蛋白，與對照的蛋白質(zhì)組圖譜相似系數(shù)為0.813。利

4、用質(zhì)譜分析研究了接種白粉病菌后黃瓜葉片病程抗性相關(guān)蛋白質(zhì)組的變化，得到了5個相關(guān)蛋白：putative chlorophyll-A-B-binding protein[Castanea sativa]： Chlorophyll a-b binding protein of LHC11 typel，chloroplast precursor(CAB)(LHCP)； ribulose 1，5 bisphosphate carboxylase

5、[Pisum sativum]；Plastocyanin；Ribulose bisphosphate carboxylase small chain，chloroplast precursor(RuBisCO small subunit)。其中ribulose 1，5 bisphosphate carboxylase[Pisum sativum]與Plastocyanin均為植物光合作用的關(guān)鍵蛋白。本研究明確了黃瓜光合作用中相關(guān)蛋白與抗

6、白粉病的關(guān)系，此結(jié)果在國內(nèi)外未見報導。 4.利用農(nóng)作物殘體和木霉菌T21創(chuàng)制出新型生物菌肥。木霉菌T21利用黃瓜莖葉等殘體為營養(yǎng)基質(zhì)最佳發(fā)酵條件是：含水量100％；接種量10％；發(fā)酵溫度28℃，適宜的發(fā)酵周期為7-9d。利用固體發(fā)酵所得生物菌肥處理后的黃瓜葉片大，顏色深，植株高，而對照黃瓜葉片較小，顏色較淺，長勢較弱。菌肥對黃瓜植株生長有明顯的促進作用，株高比對照高13％；鮮重比對照高25％；干重比對照高27.5％。方差分析表明