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1、本文采用GC-MS、光學(xué)顯微鏡技術(shù)和分子生物學(xué)的有關(guān)技術(shù),以135份成齡橡膠樹(shù)亞馬遜野生種質(zhì)和130份幼齡橡膠樹(shù)亞馬遜野生種質(zhì)為材料,研究茉莉酸含量與乳管分化和天然橡膠產(chǎn)量的關(guān)系以及小橡膠粒子膜蛋白的多態(tài)性與天然橡膠產(chǎn)量的關(guān)系,旨在闡明橡膠樹(shù)產(chǎn)膠能力的生理生化基礎(chǔ),為發(fā)展橡膠樹(shù)產(chǎn)量早期預(yù)測(cè)技術(shù)提供理論依據(jù)。 利用機(jī)械傷害誘導(dǎo)乳管分化的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),采用實(shí)驗(yàn)形態(tài)學(xué)的方法檢測(cè)130份幼齡橡膠樹(shù)亞馬遜野生種質(zhì)乳管分化能力。結(jié)果表明,這些野
2、生種質(zhì)間的乳管分化能力存在明顯差異。3.1%的種質(zhì)在機(jī)械傷害5天后分化出次生乳管,32.3%的種質(zhì)在機(jī)械傷害9天后分化出次生乳管,64.1%的種質(zhì)在機(jī)械傷害9天后仍無(wú)次生乳管分化。以橡膠樹(shù)高產(chǎn)無(wú)性系RY7-33-97為材料,研究機(jī)械傷害對(duì)樹(shù)皮內(nèi)源茉莉酸含量的影響。機(jī)械傷害0.5小時(shí)后,樹(shù)皮內(nèi)源茉莉酸含量明顯增加,4小時(shí)后達(dá)到高峰,為對(duì)照的20倍左右,推測(cè)亞馬遜野生橡膠樹(shù)種質(zhì)問(wèn)乳管分化能力的差異可能與內(nèi)源茉莉酸含量有關(guān)。割膠樹(shù)膠乳內(nèi)源茉莉
3、酸含量顯著高于未開(kāi)割樹(shù)。以?xún)山M產(chǎn)量存在明顯差異的成齡橡膠樹(shù)亞馬遜野生種質(zhì)為材料,研究膠乳內(nèi)源茉莉酸含量與乳管分化能力和天然橡膠產(chǎn)量的關(guān)系。結(jié)果表明,高產(chǎn)組的膠乳內(nèi)源茉莉酸的含量和有功能韌皮部次生乳管列數(shù)與細(xì)胞層數(shù)的比值顯著高于低產(chǎn)組。小橡膠粒子膜蛋白與天然橡膠生物合成有關(guān),由單拷貝基因編碼。在檢測(cè)的135份種質(zhì)中,75份的核苷酸序列與報(bào)道(AJ223388)的序列完全一樣,占55.6%;2.2%的種質(zhì)在編碼區(qū)的第140位堿基發(fā)生C-G的
4、變異或出現(xiàn)雙峰;39份種質(zhì)第529和530位點(diǎn)的序列由AC變異為GT,占28.9%,2份種質(zhì)在第529和530位點(diǎn)的序列由AC變異為GC,占1.5%,18份種質(zhì)在第529和530位點(diǎn)的序列出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象,占13.3%。在小橡膠粒子膜蛋白的編碼區(qū)中,139-141的3個(gè)堿基編碼第47個(gè)氨基酸,當(dāng)140位堿基由C變異為G時(shí),氨基酸由T(蘇氨酸)變?yōu)镾(絲氨酸);529-531的3個(gè)堿基編碼第147個(gè)氨基酸,其中,529和530位堿基存在AC(
5、與發(fā)表序列一致)、GT、GC3種情況,對(duì)應(yīng)的氨基酸分別是T(蘇氨酸)、V(纈氨酸)、A(丙氨酸)。另外根據(jù)529和530位的雙峰情況,推測(cè)529和530位堿基可能還存在AT的類(lèi)型,對(duì)應(yīng)的氨基酸為Ⅰ(異亮氨酸)。這些氨基酸只是在少數(shù)位點(diǎn)處發(fā)生變異,而且,相同位點(diǎn)的變異均屬于同類(lèi)氨基酸替換,推測(cè)不會(huì)影響到該蛋白質(zhì)的活性。根據(jù)這些結(jié)果,天然橡膠產(chǎn)量的差異與膠乳內(nèi)源茉莉酸含量有關(guān),與小橡膠粒子膜蛋白的多態(tài)性無(wú)關(guān)。本研究結(jié)果為發(fā)展橡膠樹(shù)產(chǎn)量早期預(yù)
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